第八周周一生物化学第十六章RNA生物合成转录.ppt

前体mRNA的剪接主要是去除内含子 在细胞核内出现的初级转录物的分子量往往比在胞质内出现的成熟mRNA大几倍，甚至数十倍。核酸序列分析证明，mRNA来自hnRNA，而hnRNA和DNA模板链可以完全配对 去除初级转录物上的内含子，把外显子连接为成熟RNA的过程称为mRNA剪接（mRNA splicing）。 第六十二页，共一百二十一页，2022年，8月28日 鸡卵清蛋白成熟mRNA与DNA杂交电镜图 20世纪70年代末, 基因断裂性概念 第六十三页，共一百二十一页，2022年，8月28日 真核生物结构基因，由若干个编码区和非编码区互相间隔开但又连续镶嵌而成，去除非编码区再连接后，可翻译出由连续氨基酸组成的完整蛋白质，这些基因称为断裂基因。 断裂基因(splite gene) 非编码区 A~G 编码区1~7 鸡卵清蛋白基因：第一个被详细研究的断裂基因 第六十四页，共一百二十一页，2022年，8月28日 2. 外显子(exon)和内含子(intron) 外显子 在断裂基因及其初级转录产物上出现，并表达为成熟RNA的核酸序列。 内含子 隔断基因的线性表达而在剪接过程中被除去的核酸序列。 第六十五页，共一百二十一页，2022年，8月28日 Transcription and past-transcribed modification for albumin gene A B C D E F G L 1 2 3 4 5 6 7 5’ 47 185 51 129 118 143 156 1043 gene-7.7kb 5’ hnRNA transcription AAA AAA m7G5’ppp5’ m2’G 5’ modification modified mRNA AAA AAA 5’ lariat mRNA to form lariat m7G5’ppp5’ m2’G AAA AAA 5’ mature mRNA splicing m7G5’ppp5’ m2’G 第六十六页，共一百二十一页，2022年，8月28日 1. 内含子形成套索RNA被剪除 剪接首先涉及套索RNA（lariat RNA）的形成，即内含子区段弯曲，使相邻的两个外显子互相靠近而利于剪接。 此后，还发现内含子近3′端的嘌呤甲基化，例如3mG是形成套索所必需的。 2. 内含子在剪接接口处剪除 大多数内含子都以GU为5?端的起始，而其末端则为AG-OH-3?。 5?GU……AG-OH-3?称为剪接接口（splicing junction）或边界序列。 剪接后，GU或AG不一定被剪除。 第六十七页，共一百二十一页，2022年，8月28日 pG-OH (ppG-OH, pppG-OH) U-OH GpU pGpA 第一次转酯反应 第二次转酯反应 UpA GpU 外显子1 内含子 外显子2 G-OH UpU pGpA 剪接过程的二次转酯反应 3. 剪接过程需两次转酯反应 第六十八页，共一百二十一页，2022年，8月28日 AG……. UCCAUACAUAPPPGm AUGAUGU PPPGm exon-1 exon-2 intron-1 U1-snRNA U2-snRNA pG-O-H ….....AGGUAUGU UACUACA 剪接体 ① 4. 剪接体是内含子剪接场所 hnRNA 第六十九页，共一百二十一页，2022年，8月28日 ② ③ UACUACA - AG UG U4 U5 U6 E1 E2 U1 U2 UACUACA - AG UG U6 E1 E2 U1、U4、U5 第七十页，共一百二十一页，2022年，8月28日 5. 前体mRNA分子有剪切和剪接两种模式 前体mRNA分子的加工除上述剪接外，还有一种剪切（cleavage）模式。 剪切指的是剪去某些内含子后，在上游的外显子3?-端直接进行多聚腺苷酸化，不进行相邻外显子之间的连接反应。 剪接是指剪切后又将相邻的外显子片段连接起来，然后进行多聚腺苷酸化。 第七十一页，共一百二十一页，2022年，8月28日 6. 前体mRNA分子可发生可变剪接 许多前体mRNA分子经过加工只产生一种成熟的mRNA，翻译成相应的一种多肽；有些则可剪切或（和）剪接加工成结构有所不同的mRNA，这一现象称为可变剪接（alternative splicing），又称选择性剪接。 第七十二页，共一百二十一页，2022年，8月28日 真核细胞基因的前体mR