DB15T 2195—2021规模化牛场牛病毒性腹泻-黏膜病净化技术规范.pdfVIP

ICS 65.020.30 CCS B41 15 内 蒙 古 自 治 区 地 方 标 准 DB15/T 2195—2021 规模化牛场牛病毒性腹泻-黏膜病净化技术 规范 Technical Regulation of Eradication of Bovine viral diarrhea in Cattle Farms 2021-05-25 发布 2021-06-25 实施 内蒙古自治区市场监督管理局 发 布 前 言 本文件按照GB/T 1.1—2020 《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 本文件由内蒙古自治区畜牧业标准化技术委员会（SAM/TC 19）归口。 本文件起草单位：内蒙古大学、内蒙古自治区动物疫病预防控制中心、内蒙古农业大学、内蒙古蒙 牛乳业（集团）股份有限公司研究院、华威特（江苏）生物制药有限公司、赤峰圣泉生态牧业有限公司。 本文件主要起草人：王炜、王永杰、徐晓静、赵杰军、程晓飞、贺永强、张福隆、田茂、葛旭升、 李庆东、王洪、闫喜军、王潇、李光鹏、胡薇。 规模化牛场牛病毒性腹泻-黏膜病净化技术规范 1 范围 本文件规定了规模化牛场牛病毒性腹泻-黏膜病净化的检测方法，无疫场群的建立、维持及综合生 物安全措施。 本文件适用于规模化牛场牛病毒性腹泻-黏膜病的检测及免疫无疫场的建立。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本 文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 GB/T 18637-2018 牛病毒性腹泻/粘膜病诊断技术规范 NY/T 1168 畜禽粪便无害化处理技术规范 农医发〔2017〕25号 病死及病害动物无害化处理技术规范 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 牛病毒性腹泻-黏膜病 Bovine viral diarrhea-mucosal disease 由牛病毒性腹泻病毒引起的牛的传染病。 3.2 净化 Eradication 对规模化牛场采取一系列措施，达到清除牛病毒性腹泻-黏膜病的过程。在某一限定的牛场内，根 据牛病毒性腹泻病毒的监测结果，及时发现并淘汰持续性感染（Persistent infection，PI）牛，使规 模化牛场中牛病毒性腹泻-黏膜病逐渐被清除的疫病控制方法。 4 材料与方法 4.1 仪器 PCR仪、凝胶成像系统、高速台式冷冻离心机、组织研磨器或者研钵、普通冰箱、微量移液器、酶 标仪、恒温箱、高压灭菌锅。 4.2 试剂 RNA提取试剂盒；反转录酶、聚合酶，-20 ℃保存，避免反复冻融；除非另有说明，在检测中使用 的试剂均为分析纯；实验室用水应符合GB/T 6682 的要求。 4.3 检测方法 4.3.1 抗原检测 根据情况，选择下列之一或组合方法进行检测。 4.3.1.1 荧光定量PCR 参照GB ∕T 18637-2018，6.3 荧光RT-PCR检测方法。 4.3.1.2 RT-PCR 检测 采用附录A RT-PCR检测方法进行检测。 4.3.1.3 ELISA 检测 采用商品化抗原捕捉ELISA方法。 4.3.2 血清学检测 参照GB/T 18637-2018，6.2 病毒中和试验部分或6.4部分 BVDV抗体间接ELISA试验方法进行检测。 4.3.3 合格免疫抗体判定标准 4.3.3.1 个体免疫抗体合格标准，采用病毒中和试验，参照 GB/T 18637-2018，6.2 病毒中和试验部 分或 6.4 部分 BVDV 抗体间接 ELISA 试验方法进行检测。血清