水产品中土霉素、四环素、金霉素和多西环素残留量的测定.docxVIP

— — PAGE 1 — 水产品中土霉素、四环素、金霉素和多西环素残留量的测定  2023年最新版食品安全抽检实施细则颁布了针对于鱼、虾、蟹、鳖及海参等水产品可食组织中土霉素、四环素、金霉素和多西环素残留量的测定方法《GB 31656.11-2023 水产品中土霉素、四环素、金霉素和多西环素残留量的测定》。本标准替代了《GB/T 22961-2023 河豚鱼、鳗鱼中土霉素、四环素、金霉素、强力霉素残留量的测定 液相色谱-紫外检测法》其中第二法液相色谱-串联质谱法为今年新增的检测方法，逗点生物参照该标准进行试验，并优化了部分参数，建立了一份具有良好回收率及稳定性，能满足国标要求的SPE-HPLC-MS/MS方法，可供参考。 01样品提取  准确称取粉碎均匀的鱼、虾等水产类样品2 g（精确至0.02 g）于干净离心管中，加入6 mL NaEDTA-Mcllvaine溶液（pH=40.05）和2 mL醋酸铅溶液，涡旋混合1 min，超声10 min，4℃下以8000离心r/min离心5 min。 取上清液于另一干净离心管，残渣继续加入6 mL NaEDTA-Mcllvaine溶液（pH=40.05）按上述方式重复提取两次，合并全部提取液，加入10 mL正己烷，涡旋1 min，8000 r/min离心5 min，弃正己烷层，下层液取出10 mL待净化。 NaEDTA-Mcllvaine缓冲溶液（0.1mol/L）：称取柠檬酸12.9g、磷酸氢二钠10.9g、乙二胺四乙酸二钠37.2g,各自加水适量使溶解，混合，用水稀释至1000mL,用0.1 mol/L HCl或0.1 mol/L NaOH调节pH至4.00.05。 醋酸铅溶液（20.0g/L）：取醋酸铅20.0g,加水溶解并稀释至1000mL。  02样品净化  Copure HLB，60mg/3mL  活化：将CopureHLB固相萃取柱依次用5 mL甲醇，5 mL水活化。  上样：在固相萃取柱中加入上述待净化液。  淋洗：依次用5 mL水，5 mL 5%甲醇-水溶液淋洗固相萃取柱，抽干。  洗脱：加入5 mL甲醇洗脱固相萃取柱，收集全部洗脱液，45℃下氮吹至100 L左右，加入0.1%甲酸溶液定容至1 mL,过尼龙滤膜，上机。  03基质标准曲线溶液的制备 取空白基质同正常样品一样操作，收集洗脱液后，于洗脱液中分别加入适量标液，再与其他样品洗脱液一同氮吹，定容，使最终上机溶液的浓度分别为5 g/L、10 g/L、50 g/L、100 g/L、200 g/L。04仪器条件 （1）色谱条件  仪器：UPLC-MS/MS  （Thermo Fisher TSQ Endura）  色谱柱：Hypersil GOLD C18  (2.1 mm100 mm，1.9 m)  流动相：A：水（0.1 %甲酸） B：甲醇（0.1 %甲酸）  洗脱方式：梯度洗脱，见表1  流速：0.3 mL/min  柱温：30℃  进样量：5 L 表1梯度洗脱程序 （2）质谱条件  离子源：HESI 电喷雾电压：3500 V  鞘气压力：40 arb 辅气压力：2arb  离子传输管：380 ℃ 辅气温度：350 ℃ 表2组分名称、保留时间及特征离子一览表（*为定量离子）  05实验结果  表3 兽残加标回收实验结果  图1添加水平为100.0g/kg时大头鱼中四环素类的总离子流图  图2添加水平为100.0g/kg时虾仁中四环素的总离子流图  06订购信息  如对相关产品感兴趣，欢迎来电咨询  电话：400-878-7248