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- 2023-04-21 发布于内蒙古
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;学习目标:;1.基因工程的基本操作程序;常用的受体细胞:;花粉;农杆菌转化法;3.将目的基因导入受体细胞;3.将目的基因导入受体细胞;显微注射法;表达载体提纯;Ca2+;外源基因在受体细胞中能表达的原因(基因工程得以实现的理论基础):;受体细胞;3.将目的基因导入受体细胞; 在棉花细胞中,重组表达载体是否导入成功?是否可以稳定维持并表达出Bt蛋白?表达出的Bt蛋白是否具有杀虫的功效?;4.目的基因的检测与鉴定;4.目的基因的检测与鉴定;;4.目的基因的检测与鉴定;4.目的基因的检测与鉴定;探究实践:DNA片段的扩增及电泳鉴定;2.DNA片段电泳鉴定的原理;;二、材料用具;10倍浓缩的扩增缓冲液(含Mg2+);使DNA充分变性,以利于引物更好地与模板结合;DNA片段的电泳鉴定; 将扩增得到的PCR产物与凝胶载样缓冲液(内含指示剂)混合,再用微量移液器将混合液缓慢注入凝胶的加样孔内。留一个加样孔加入指示分子大小的标准参照物;1.为避免外源DNA等因素的污染,PCR实验中使用的微量离心管、枪头和蒸馏水等在使用前必须进行高压灭菌处理。
2.该实验所需材料可以直接从公司购买,缓冲液和酶应分装成小份,并在-20℃储存。使用前,将所需试剂从冰箱拿出,放在冰块上缓慢融化。
3.在向微量离心管中添加反应组分时,每吸取一种试剂后,移液器上的枪头都必须更换。
4.在进行操作时,一定要戴好
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