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x-染色质的制片与观察; 1)通过实验了解形成X-染色质的原理,及其
在临床诊断上的应用。
2)掌握人类X-染色质的制片, 能在显微镜 下正确识别Barr氏小体。
;二.实验原理;在果蝇和哺乳动物中,X染色体上的基因在纯合的雌性细胞中有相同的两份,雄性中只有一份。可是雌雄在表型上却看不出任何显著的差别,这种现象的遗传机制是由于存在一种剂量补偿效应。
剂量补偿效应:是指在XY性别决定机制的生物中,使性连锁基因在雌雄性别中有相等或近乎相等的有效剂量的遗传效应。;M.F.Lyon提出了阐明哺乳动物剂量补偿效应和形成Barr body的X染色体失活的假说(Lyon hypothesis)其主要内容是:
1、正常雌性哺乳动物的体细胞中,两条X染色体中只有一条X染色体在遗传上有活性,另一条在遗传上无活性。其结果使X连锁基因得到剂量补偿,保证染色体为XX的雌性和XY的雄性具有相同的有效基因产物。;2、X染色体失活是随机的。
在同一哺乳动物的体细胞中,有些细胞里父源的X染色体失活;另一些细胞里,母源的X染色体失活。
3、失活发生在胚胎发育早期。
例如人类,在胚胎发育第16天时(合子细胞增殖到5--6千个细胞时)发生失活。某一个细胞的一条X染色体一旦失活,这个细胞的所有后代细胞中的该X染色体均处于失活状态。 ;此外,细胞学的研究发现Barr小体的数目正好是X染色体数目减1。
设X染色体数为n,则巴氏小体数目=n-1,XXX的个体则具2个巴氏小体。
因而可以根据X染色质的有无和数目来鉴定胎儿性别及性别畸形。; 因为失活的X染色体已经异染色质化,成为
功能性异染色质。失活的X染色体的固缩周期
与其它染色体是不同步的,且它是在S期末开始
复制的,是一种浓缩的、惰性的异染色质化的
小体。;实验材料:人体口腔粘膜或毛发根部细胞。
实验试剂:50%冰醋酸、改良碱性品红染色液或醋酸地衣红染色液。
实验器材用具:显微镜、牙签、盖片、 玻片、镊子、滤纸、
;1.口腔颊部粘膜细胞巴氏小体观察:
取材:漱口2-3次,用牙签钝面刮取颊部粘膜上皮细胞。
涂片:将牙签上的细胞平铺涂在载片上,晾干1-2分钟。;一、实验目的;二、实验原理;人工诱??多倍体的方法; 在诱发多倍体方法中,以应用化学药剂更为有效。如秋水仙素,其主要作用是抑制细胞分裂时纺锤体的形成,使染色体不走向两极而被阻止在分裂中期,这样细胞不能继续分裂,从而产生染色体数目加倍的核。若染色体加倍的细胞继续分裂,就形成多倍性的组织,由多倍性组织分化产生的性细胞,所产生的配子是多倍性的,因而也可通过有性繁殖方法把多倍体繁殖下去。
;多倍体的特点 ;抗逆性强 多倍体新陈代谢旺盛,适应环境能力强。表现为抗病、抗旱、耐寒,分布广。 如多倍体从赤道到极地都有分布;高山上多倍体多;在炎热夏季的稻田里常发现多倍体花粉粒。
营养成分高 碳水化合物、蛋白质、维生素、植物碱等表现偏高。 如四倍体番茄Vc含量比二倍体高一倍。四倍体紫罗兰、桂竹香芳香性强、蜜腺多。
; 植物染色体压片法的原理;三、实验材料;四、实验步骤;染色体根尖压片;5、酸解:取出根尖,蒸馏水漂洗后,用针筒认真吸干残余水分,切取少量分生区部位根尖,置双凹皿中,加适量解离液,解离5~10min左右,直至根尖变软,取出至于另一凹槽中。
6、水洗:用蒸馏水漂洗3~5次,吸去多余水分。
7、染色:将根尖置于双凹片中,加适量改良石炭酸品红进行染色,10~15min后取出,置于载玻片上。
8、压片:加盖片后,一手固定盖片,用镊子轻轻敲打盖片,使细胞分散开,铺成薄薄一层,取一张滤纸盖在盖片位置,压平并吸取多余染液。
9、镜检。;一、实验目的;二、实验原理;三、实验材料;;伴性遗传方式;伴性遗传方式;X染色体例外不分离现象;;3、待F1幼虫出现后,除去亲本果蝇;
4、F1代长成后,观察成蝇的性状,并记录
5、将F1代成蝇麻醉后,挑5-6对放入F2代培养管中培养;待管壁上出现F2代幼虫或者蛹时,除去F1代亲本果蝇。
6、统计F2代成蝇的雌雄比例性状,50-100只。
7、统计实验结果并填写统计表,进行X2检验,;卡方检验法—适合度检验;
统计日期;一、实验目的;二、实验原理;巨大染色体的形成; 在这些染色体臂上可以看到染色深浅不同,被称做明带、暗带的横纹,这些横纹的位置,宽窄、数目都具有物种的特异性。不同物种,不同染色体的不同部位形态位置是固定的,因此根据染色体各条臂带纹特征和各条臂端部带纹特征能准确识别各条染色体。; 由于在唾液腺细胞中8条染色体之间以着丝粒互相连结在一起,经碱性染料染色后,可以观察到一个染色较深的染色中心。短小的第4染色体和x染色体的着丝粒在端部,所以看上去
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