菠萝蜜低聚肽对db-db小鼠炎症反应、血糖及血脂的影响.docxVIP

? ? 菠萝蜜低聚肽对db/db小鼠炎症反应、血糖及血脂的影响 ? ? 刘欣然 康家伟 王天星 郝云涛 珠娜 刘睿 胡佳妮 李臻 于晓晨 李勇 摘 要：目的：研究菠萝蜜低聚肽（JOPs）干预对db/db糖尿病模型小鼠炎症反应、血糖及血脂的影响作用。方法：选择db/db糖尿病小鼠模型，将其随机分为3个JOPs组（0.2、0.4、0.8g/kg·BW）以及糖尿病模型对照组、二甲双胍对照组、乳清蛋白对照组，并选用db/m小鼠作为非糖尿病小鼠空白对照。经过为期6个月的干预，检测小鼠空腹血糖（FPG）、血清胰岛素（INS）、白细胞介素6（IL-6）、白细胞介素8（IL-8）、白细胞介素10（IL-10）和肿瘤坏死因子α（TNF-α）、C反应蛋白（CRP）以及脂代谢指标。结果：JOPs可显著降低db/db糖尿病小鼠空腹血糖水平及胰岛素抵抗指数;可使血清IL-6、TNF-α、总胆固醇（TC）和甘油三酯（TG）显著降低，并使高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）显著升高。结论：JOPs干预可有效降低糖尿病小鼠的血糖水平，改善胰岛素抵抗，同时有效调节炎症反应及血脂代谢。 Key：菠萝蜜低聚肽;降血糖;炎症;db/db糖尿病小鼠 糖尿病（DM）是一种常见的内分泌代谢系统疾病[1-2]，常伴有长期免疫系统失衡、代谢综合征或与肥胖相关的代谢异常，并且DM的许多并发症也都表现出异常的炎症反应，因此炎症被认为是DM发生发展的主要驱动力并与胰岛素抵抗（IR）密切相关。目前，防治DM及其并发症已成为科学工作者研究的重点，其中控制血糖水平和调节炎症反应则是重中之重。 生物活性肽（BAP）是从二肽到复杂的线性、环形结构的不同肽类的总称，是源于蛋白质的多功能化合物，具有特殊的生理特性，在医药和保健食品领域的研究已成为热点。研究发现，许多植物来源的BAP具有降血糖的功效，如燕麦低聚肽、人参低聚肽和核桃低聚肽等[3-7]。低聚肽作为BAP中的一类，因其更短小的氨基酸组成，具有更易吸收且活性更强的特性，有广阔的发展前景。菠萝蜜（Artocarpus heterophyllus ）主要产自东南亚、印度及我国南部。与其他热带水果相比，菠萝蜜的果肉和种子均含有更多的蛋白质、钙、铁、维生素等，其中果肉中蛋白质含量为1.2%～1.9%，而通常不被利用的种子中则含有更多的蛋白质，含量为6.6%～7.0%，某些品种的菠萝蜜种子蛋白质含量甚至高达11.85%[8-9] 。同时，菠萝蜜中还有多种人体必需的氨基酸，如精氨酸、胱氨酸、组氨酸、亮氨酸、赖氨酸、蛋氨酸、苏氨酸和色氨酸等[10]，是水果中非常优质的肽类来源。研究发现，菠萝蜜具有一定的降血糖作用[11-12]，在短期菠萝蜜低聚肽（JOPs）干预实验中也可发现其显著的降血糖作用，但对于其降糖机制以及对炎症反应的影响尚不可知。同时，DM及炎症发生的同时伴随着的血脂代谢异常也值得关注。因此，本研究探究JOPs长期干预对于db/db糖尿病小鼠血糖及炎症反应的调节作用。 1 材料与方法 1.1 受试物 JOPs，淡黄色固体粉末，利用生物酶解技术从菠萝蜜果肉及种子中制取得到的小分子BAP的混合物，主要成分为分子量1 000Da的低聚肽（海南盛美诺生物技术有限公司）。 1.2 实验动物 选择12周龄SPF级雄性db/db型糖尿病小鼠（空腹血糖水平≥11.1mmol/L）48只及与之周龄、性别匹配的非DM健康同窝出生仔畜db/m小鼠（lepr-/m）8只。db/db小鼠及正常健康小鼠db/m均由常州卡文斯实验动物有限公司提供。动物饲养在北京大学医学部实验动物科学部，动物实验环境设施（屏障环境）合格证书：医动字第 01-2055。动物分笼饲养，每笼2只，均给予普通饲料，饲养环境符合屏障环境，温度（25±1）℃，相对湿度50%～60%RH，室内照明控制在12 h/12 h光暗周期节律。动物喂养及实验操作严格按照《北京市实验动物管理条例》执行，并经过北京大学医学部伦理委员会审核通过（批准号：LA2017189）。 1.3 主要试剂和仪器 葡萄糖（纯度99.8%），北京金汇太亚化学试剂有限公司;浓缩乳清蛋白Lacprodan 80，（纯度79.2%），北京中柏创业化工产品有限公司;格华止盐酸二甲双胍片，国药准字中美上海施贵宝制药有限公司;三诺安稳血糖仪，长沙三诺生物传感技术有限公司;胰岛素ELISA试剂盒，南京建成生物工程研究所;IL-6 ELISA试剂盒，南京建成生物工程研究所;IL-8 ELISA试剂盒，南京建成生物工程研究所;IL-10 ELISA试剂盒，南京建成生物工程研究所;TNF-α ELISA试剂盒，南京建成生物工程研究所;BMG FLUO star Omega多功能酶标仪，BMG LABTECH公司;AU480全自动生