人教教学血红蛋白的提取与分离课程.pptxVIP

人教教学血红蛋白的提取与分离课程第1页/共16页第2页/共16页一、基础知识（一）凝胶色谱法：（也叫分配色谱法）根据相对分子质量的大小分离蛋白质的有效方法。原理：所用凝胶实际上是一些微小的多孔球体，大多数是由多糖类化合物构成的。在小球体内部有许多通道，当相对分子质量不同的蛋白质通过凝胶时，相对分子质量较小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道，路程较长，移动速度较慢；而相对分子质量较大的蛋白质无法进入凝胶内部的通道，只能在凝胶外部移动，路程较短，移动速度较快。相对分子质量不同的蛋白质因此得以分离。第3页/共16页凝胶色谱法分离蛋白质的原理第4页/共16页（二）缓冲溶液具有缓冲作用的溶液称缓冲溶液。缓冲溶液能够抵制外界的酸和碱对溶液PH的影响，维持PH基本不变。一般由缓冲物质对构成，如：H2CO3 / NaHCO3 、NaH2PO4 / NaHPO4作用机制：以H2CO3 / NaHCO3 为例A：当酸性物质（如乳酸）进入后，与溶液中的 NaHCO3 发生作用，生成乳酸钠和碳酸，而碳酸可以分解成CO2和H2O，CO2排出则PH不变； B：当碱性物质（如碳酸钠）进入后，与溶液中的H2CO3 发生作用，形成 NaHCO3 ，溶液PH不变。第5页/共16页（三）电泳1、定义：是指带电粒子在电场的作用下发生迁移的过程。2、原理：许多大分子都具有可解离的基团，在一定的PH下，这些基团会带上正电或负电；