第3章生化过程中化学及生物参数检测技术.ppt

1 2 3 4 5 6 7 1 阴极，2 气体渗透膜，3 外壳，4 电解质，5 阳极，6 绝缘体，7 电解质薄膜 当两电极之间加一极化电压(0.6-0.8V)，有氧存在时，电极上将产生氧化还原反应： 阴极： O2+2H2O+4e-→4OH- 阳极： 4Ag+4Cl-→4AgCl+4e- 由此可见，在两电极之间就会有电流产生 * 典型的极化曲线见下图。 * 当极化偏置电压一定时，电极极化电流的强弱与溶液中氧的分压呈线性关系，根据Fick定律有： i 电极电流，k1 常数，D 膜中氧扩散系数，a 膜材料氧浓度，A 阴极表面积，X 气体渗透膜厚度，pO2 溶液中氧分压 若电极材料一定，物理特性和尺寸一定，那么k1 、D 、a 、A 、X 都确定，则： i=KpO2 即电极电流与氧分压成正比关系。则可测定溶液中氧浓度。 * 由Henry定律可知，溶液中的氧浓度与其分压成正比 CL=pO2aL 其中：CL 溶氧浓度，pO2 氧分压，aL 溶解度常数 如果aL是常数，则电极电流信号可直接转化为溶液。但aL受温度和溶液组成的变化而改变。 因此，用溶氧电极来测量发酵液中氧含量时，只有当罐内温度、压力及发酵液组成一定时才准确。 * 三 溶氧电极的使用 极谱电极在测量中的动态响应速度、稳定性、温度漂移特性都比较好，能适应工业发酵要求。典型电极性能如下： * * 对电极寿命和稳定性影响最大的因素是发酵罐的高温灭菌。为了消除这种损害，一般采用电极保护套的方法，将溶氧电极装在可伸缩的保护套，灭菌后再推入发酵罐。 电极安装在发酵罐中最合适的位置，能准确反映发酵液中溶氧的变化，其安装开孔不影响灭菌及留死角。一般安装在中部偏下，安装时要有一定的向下的倾斜角，防止安装口积液或清洗不到。 溶氧电极的使用，需要注意四个方面：搅拌、温度、压力、以及电极校准。 * 1 搅拌的影响 由于溶氧电极在工作中存在明显的电流，自身消耗大量的氧。电极信号与氧向电极表面传递的速率成比例，而氧的速率受到跨膜扩散速率控制。这一速率与发酵液中氧的浓度成比例，其比值取决于总的传质过程。 电极工作一般条件是，氧向膜外表面的传递速率很快且不受限制。整个过程受跨膜传递的限制，比例常数易维持恒定。故需合理搅拌以满足工作条件。 * 2 温度的影响 溶氧电极的信号随温度升高显著增强，这是因为温度影响氧扩散速率。因此在使用时要注意温度的影响。 一些溶氧电极带有温度传感器等仪表，以实现自动温度补偿。 在计算机控制的发酵罐，可以通过软件利用单独的温度传感器信号，自动进行溶氧补偿。 * 3 压力的影响 压力的变化会影响溶氧电极的读数，是因为增大了发酵液中氧分压。一般是因为压头的改变(出口滤器或管路压降产生)。可采用下列方法进行校准： 在大气压下对电极进行校准； 在预期的操作压力下对电极进行校准； 根据氧分压或溶氧浓度给出所有结果，基于校准条件下的计算机进行校准，这些是影响电极响应的最直接的参数。 * 在对发酵罐接种之前需对溶氧电极进行校准，一般采用线性校准，包括零点和斜率的调节。 零点是在向发酵罐通入大量的N2后进行设定。不用氮气校验则一般在灭菌后立即进行(Why?)。 斜率、灵敏度和量程校准，在接种之前通入最大空气流量，并使搅拌速率设定在发酵期间的搅拌速率，等到测量值显示稳定，校准该读数为100%氧分压。校准时罐压应与发酵操作压力相同。 4 校准 * 3.3 发酵罐内O2与CO2分压的测量 * 一 氧分析 微生物生长代谢过程中要利用氧，微生物的氧利用率(OUR)是生化反应过程的重要参数，因此，测量发酵排出气体中的氧含量成为研究生物生长和产物形成的主要变量。 氧浓度的分析测量主要采用磁风式氧分析仪(磁氧分析仪)。 原理：利用氧具有极高的磁化特性设计而成，当氧气通过非均匀磁场的作用时，将会形成“热磁对流”或称“磁风”，该磁风对敏感元件产生冷却作用，利用此进行氧浓度的检测。 * 含氧混合气进入测量环室，氧气被磁场吸入水平管。 水平管绕有被加热的铂电阻丝的电桥线圈a、b，进入水平管的氧气受热温度升高，氧的磁化率随温度升高而降低，减弱磁场对氧的吸力。 变热的氧分子不断被冷却的氧分子所补充而排出磁场，因此在水平管中形成氧的对流，“热磁对流”，其强度随混合气中氧含量变化。 对流强度的改变，使桥臂线圈a、b产生不同程度的冷却，使桥臂电阻改变，由a、b接至电桥测量电路，在电桥中产生不平衡电流，电桥两端输出不平衡电压，该电压信号与氧含量成正比关系。 * 到电桥电路 气体入口 气体出口 磁体 玻璃管 玻璃环形管 a b * 二 尾气CO2的检测 大规模工业发酵的CO2量的测定具有重要价值，是发酵过程控制中重要在线信息。 确定产生的CO2量有助于计算碳回收。 研究发现生物量生长率与CO2生成率成线性相关性，进而开发估计细胞浓度的