高二生物动物细胞融合与单克隆抗体课件.ppt

2012年下学期 制作19 湖南长郡卫星远程学校 高二生物动物细胞融合与单克隆抗体课件 　　1970年，有两位科学家做了一个人—鼠细胞融合实验，以证明细胞膜上的蛋白质分子是运动的。那么，如何实现人—鼠细胞的融合，以及动物细胞融合后还有什么用途呢？这就是今天我们这节课学习的内容。 ②动植物细胞在结构上有何区别？这与它们杂交或融合过程有什么影响？ ③植物体细胞杂交诱导原生质体融合常用的方法有哪些？ 离心、振动、电激等物理方法；PEG等化学方法 动物细胞无细胞壁，动物细胞融合过程中不须去除细胞壁和再生出细胞壁。 ①植物体细胞杂交最终得到的是完整的植物个体，动物细胞融合后能形成杂种动物个体吗？ 不能，只能得到杂交细胞 ⑤为什么要用灭活的病毒？ 病毒一般对生物体是有伤害的。 ⑥动物细胞融合有什么意义？ 突破了有性杂交方法的局限，使远源杂交成为可能。 仙台病毒 物理或 化学方法 丧失感染活性 保留融合活性 ④动物细胞融合能利用上述两类方法吗？还有其他方法吗？ 能，还可以利用灭活的病毒（生物方法）进行诱导 细胞膜的流动性 物理法：离心、振动、电激 化学法：聚乙二醇（PEG) 生物法：灭活的病毒 　　也称细胞杂交，指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。 灭活的病毒 　　病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与细胞膜上的糖蛋白发生作用，使细胞互相凝聚，细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布，细胞膜打开,细胞发生融合。 两个核的融合是在杂种细胞第一次有丝分裂时进行的 动物细胞A 诱导，融合 杂种细胞AB 有丝分裂 （膜融合、质融合） （核融合） 多核体 动物细胞B 注意：动物细胞的融合也需要把多个两种细胞放在一起，让它们随机融合后，再从中筛选杂交细胞 ⑴意义：突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交（种间、属间、科间、动植物之间）成为可能。 形成具有两个或多个细胞遗传信息的单核细胞 ⑵应用：成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育等的重要手段。 比较项目 植物体细胞杂交 动物细胞融合 过程 原理 细胞融合的过程 诱导方法 用途 细胞膜的流动性、细胞的全能性 细胞膜的流动性 去除细胞壁后诱导原生质体融合 使细胞分散后诱导细胞融合 物理、化学方法 物理、化学、生物方法（灭活的病毒） 获得杂种植株 主要用于制备单克隆抗体 细胞融合，植物组织培养 细胞融合 1、什么是抗体？抗体是由何种细胞产生的？ 2、抗体是如何产生的？ 3、一个Ｂ淋巴细胞(浆细胞)能分泌多种抗体吗？ 4、一种抗原侵入机体之后，引起机体免疫反应产生的抗体只有一种吗？ 　　用纯制的抗原多次接种于适当的成年健康动物，则激其产生免疫应答，血清中含有大量特异性抗体，又称抗血清或免疫血清。 特异性差、纯度低、产量低、反应不够灵敏 5、简述获得抗体的传统途径？这种方法获得的抗体有什么缺陷？ ⑴B淋巴细胞受抗原刺激后，可以产生特异性抗体。⑵每一个Ｂ淋巴细胞只分泌一种特异性抗体。⑶在体外，一个Ｂ淋巴细胞是不可能无限增殖的。 　　由单个B淋巴细胞经过无性繁殖（克隆），形成基因型相同的细胞群，这一细胞群所产生的化学性质单一、特异性强的抗体称为单克隆抗体。 提示2：　　我们所学的哪种细胞是可以无限增殖的？ 提示3：　　有什么方法能使B细胞产生抗体的能力和肿瘤细胞无限增殖能力同时具备呢？ 提示1：　　仅用细胞培养技术可行吗？ 一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体骨髓瘤细胞（癌细胞）能无限增殖 杂种细胞 动物细胞培养技术 动物细胞融合 单克隆抗体 1、设计方案： （二）、单克隆抗体的制备 1975年英国科学家米尔斯坦和柯勒的实验（在1984年获诺贝尔奖） 产生抗体 无限增殖 动物细胞培养 利用B淋巴细胞 的功能 利用骨髓瘤细胞 的特性 利用 技术将两种细胞融合获得具有B淋巴细胞和骨髓瘤细胞特性的杂交瘤细胞 利用 技术大量培养杂交瘤细胞 动物细胞融合 阅读教材，思考下列问题： 2.单克隆抗体制备过程 诱导其融合的方法有哪些？ 融合后培养液中有几种细胞 怎样筛选出杂交瘤细胞？杂交瘤细胞有何优点？ 注射抗原的目的是什么 为何要进行克隆化培养和专一抗体检测，多次筛选？ 大量增殖杂交瘤细胞获得单克隆抗体的方法是什么？ 动物细胞融合技术 B 、BB 、B瘤 、瘤瘤 、瘤 （一选）选择性培养基：只有杂交瘤细胞才能存活 获得产生相应抗体的B淋巴细胞 注射抗原 融合 筛选的培养基 克隆 注射到小鼠腹腔 体外培养 （二选）（克隆化培养和抗体检测）：选能产生所需专一