抗链球菌溶血素O抗体检测标准操作规程.docx

抗链球菌溶血素 O抗体检测标准操作规程 ××医院检验科临床免疫室作业指导书 文件编号:XXX 生效日期： 共 页 第 页 1. 目的 建立检测血清中抗链球菌溶血素 O抗体含量的标准操作规程，保证实验结果的精确性及 准确性。 2. 原理 采用免疫比浊法进行检测：包被有链球菌溶血素 O 的聚苯乙烯颗粒与带有抗链球菌溶 血素 O抗体(ASO) 的样本混合在一起时会发生凝集；在散射比浊仪中造成的散射光强度取 决于样本中的抗链球菌溶血素 O含量，因此，通过与已知浓度的标准品稀释液进行比较，就可 以确定某个样本中的抗链球菌溶血素 O 的含量。该方法学比对世界卫生组织关于抗链球菌 溶血素 O 的国际参考品准备进行标准化。 3. 标本要求 根据试剂盒说明书要求收集存储样本，血清标本采集用标准样本试管或含分离胶的试 管，血浆样本采集使用肝素(Li ，Na ) 或 K3 EDTA，一般来说，标本在 2~8℃可稳定 7 天，－20℃可稳定6个月。 4. 试剂与仪器 R1TRIS缓冲液、R3Borate缓冲液，包被有链球菌溶血素 O抗原的乳胶颗粒。所用仪器 为全自动生化分析仪。 5. 操作步骤 开机后仪器自检，自动保养，然后进入“StandBy”状态。仪器准备：每日开机维护及载入 试剂、定标和质控。样本检测，结果浏览和复查。 日常维护，关机。 6. 校正 仪器校准：每批试剂必须用新鲜试剂盒校准一次。另外，以下两种情况需要再次校准： 校准过期：批校准稳定28天，盒校准7天；根据要求进行标定：如质控结果超出范围时；更换 某些试剂时，根据规定进行多次标定。 7. 质控 在每一次建立新的参考曲线后，第一次打开试剂，以及随着每批运行的血清样品，都应检 测类风湿质控 1 和 2 。质控的测定和评价方式应当与患者样品相同。 8. 结果判断 仪器会自动计算每份样本的分析物浓度。 9. 生物参考区间 正常生物参考区间：成人≤200U／ml；儿童≤150 U／ml。 10. 性能参数 具体参见相应的试剂说明书。 11. 临床意义 11．1 ·A群链球菌可导致各种感染：皮肤病或扁桃腺周围脓肿，当上呼吸道感染时，扁桃 腺周围脓肿可能会导致肾小球肾炎、急性心内膜炎、sydenham舞蹈病﹑急性风湿热。这些感 染可导致心脏与肾脏损害。通过早期诊断﹑有效治疗，与对患者的监测，可降低这些风险。β 溶血性链球菌的几种代谢物对人体有毒性，例如：NAD多糖水解酶﹑链道酶(ADNase) ，与可 诱导免疫防御反应的透明质酸酶。针对链球菌溶血素 O ﹑链球菌脱氧核糖核酸酶类，与链球 菌透明质酸酶的抗体反应是临床上所发现的最重要的抗体反应。 11．2 ·特异性抗体的免疫测定可为临床判断链球菌感染程度及病程病期提供有用信息。 其中，抗链球菌溶血素 O抗体(ASO) 浓度的测定在临床上应用得最为广泛。85％的急性风湿 热患者 ASO的浓度增高。应当每周进行几次 ASO浓度测定，以获取有用数据。 即使在临床 上感染征象已经消失的情况下，抗体滴度的增加可以表明抗生素治疗成功，或者是存在抗原 持续刺激。