9 平板菌落分离技术《农业微生物》教学课件.pptxVIP

平板菌落分离技术;主要内容;一、纯种分离技术;用固体培养基分离纯培养;二、平板菌落的分离;平板菌落的分离;平板菌落的分离常见方法;1、稀释倒平板法（混菌法） 先将待分离的材料用无菌水作一系列的稀释(如1:10、1:100、1:1000、1:10000…)，使样品中的微生物细胞充分分散，然后分别取不同稀释液少许，与已熔化并冷却至45℃左右的琼脂培养基混合，摇匀后，倾入灭过菌的培养皿中，待琼脂凝固后，制成可能含菌的琼脂平板，保温培养一定时间即可出现菌落。;2、涂布平板法 是先将已熔化的培养基倒人无菌平皿，制成无菌平板，冷却凝固后，将一定量的某一稀释度的样品悬液滴加在平板表面，再用无菌玻璃涂棒将菌液均匀分散至整个平板表面，经培养后挑取单个菌落;3、平板划线分离法 用接种环以无菌操作沾取少许待分离的材料，在无菌平板表面进行平行划线、扇形划线或其他形式的连续划线，微生物细胞数量将随着划线次数的增加而减少，并逐步分散开来，如果划线适宜的话，微生物能一一分散，经培养后，可在平板表面得到单菌落。;4.待分离样品的稀释方法;4、稀释摇管法 （1）如果该微生物暴露于空气中不立即死亡，可以来用通常的方法制备平板，然后置放在封闭的容器中培养，容器中的氧气可采用化学、物理或生物的方法清除。 （2）对于那些对氧气更为敏感的厌氧性微生物，纯培养的分离则可采用稀释摇管培养法进行，它是稀释倒平板法的一种变通形式。 ; 待测样品经过稀释，在不同稀释浓度下，菌落生长的情况和数量不一样，稀释浓度在100000倍是，生长出的菌落数少，容易计数。当稀释浓度在10倍，100倍时，平板上生长的菌落数量多而密集，无法进行计数工作。同时，也可以看出，样品要稀释到一定浓度下，才能获得 容易辨别的单菌落。;谢 谢 / THANKS