凯式定氮法实验方法.pptxVIP

凯式定氮法实验方法;凯氏定氮法：测定化合物或混合物中总氮量的一种方法。在有催化剂的条件下，用浓硫酸硝化样品将有机氮都转变成无机铵盐，然后在碱性条件下将铵盐转化为氨，随水蒸气馏出并为过量的酸液吸收，再以标准酸滴定，就可计算出样品中的氮量。由于蛋白质含氮量比较恒定，可由其氮量计算蛋白质含量，故此法是经典的蛋白质定量方法。;凯氏定氮法： ;硝化：硝化炉 实验步骤：取2ml样液，加入到硝化管中，加入1.5g的催化剂（K2SO4: CuSO4·5H2O=3 : 1），后在通风橱中进行操作。在消化管中加入放入浓硫酸6ml消化至消化管内的液体呈现出澄清的浅蓝色。去除消化管，将其冷却后定容到50mL容量瓶中。 在消化时，电压先调低，约100v左右，一小时后再调最大。直到消化成绿色透明状。 硝化温度：300—400℃ ;蒸馏：凯氏定氮仪 实验步骤：①清洗凯氏定氮仪装置（重要） 连接进水口与自来水管，打开水龙头。打开弹簧夹2，使水进入夹套至稍高于出水口，关闭弹簧夹2和3，用酒精灯加热使蒸汽通过进气口进入反应室进行洗涤，在冷凝管下口放一个盛有硼酸-指示剂混合液的锥形瓶，冷凝管下端应完全浸没于液体中，洗涤1~2 min，观察锥形瓶中溶液是否变色，若基本不变色，证明蒸馏器已洗涤干净。将火移开，打开弹簧夹1，从加样漏斗加入少量蒸馏水，关闭弹簧夹1，由于夹套内温度降低使压力下降，可把反应室