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DNA的合成与修复;第十二章 DNA复制与修复;1964-1970 发现劳氏肉瘤病毒的遗传信息传递方式：逆转录 ; 复制：以亲代DNA或RNA为模板，根据碱基配对的原则，在一系列酶的作用下，生成与亲代相同的子代DNA或RNA的过程。;;一、DNA的半保留复制;DNA复制的可能方式;DNA半保留复制图示：; 半保留复制的证明：;;;亲代DNA（15N～15N）;复制中的大肠杆菌染色体放射自显影图;DNA的半保留复制的生物学意义：;双向复制;二、DNA复制的起点与方向;复制中的DNA ;DNA复制的主要方式;三、DNA复制的半不连续性;半不连续复制的发现;四、与DNA复制有关的酶和蛋白质;（二）大肠杆菌DNA聚合酶;DNA聚合酶催化的反应：;Ⅰ;Arthur Kornberg 1918 ;2、DNA聚合酶Ⅱ：;3、DNA聚合酶Ⅲ;DNA聚合酶Ⅲ全酶的亚基组成;DNA聚合酶Ⅲ的异二聚体; DNA聚合酶Ⅲ的β-钳子俯视图;大肠杆菌三种聚合酶比较;(三）DNA连接酶：连接DNA双链中的单链切口;DNA连接酶作用机理;(四)与DNA合成有关的其它蛋白因子(大肠杆菌中);1、拓扑异构酶; 拓扑异构酶?：使DNA一条链发生断裂和再连接。作用是松解负超螺旋，反应不需要能量。主要集中在活性转录区，同转录有关。;第37页/共71页;2、解螺旋酶 （解链酶）; 引发体可以沿模板链5’ ? 3’方向移动,具有识别合成起始位点的功能，移动到一定位置上即可引发RNA引物的合成。移动和引发均需要ATP提供能量， n’蛋白具有ATP酶的活力。引发体的移动与复制叉移动的方向相同，与冈崎片段的合成方向相反。;（五）、参与DNA复制的酶与蛋白因子总览图;五、 DNA的复制过程：（以大肠杆菌为例）;复制原点oriC和原点的识别：;（一）复制起始;;(二) 链的延长（冈崎片段的合成）; DNA链的延伸;冈崎片段引物的切除、缺口的填补和切口的连接:; 前导链和滞后链的合成（DNA聚合酶的异二聚体催化）;;(三) 复制的终止;大肠杆菌DNA复制的终止;(四) DNA复制的精确性（高保真复制）; 六、复制起始的时序控制;七、真核生物DNA复制的特点;真核DNA复制特点;真核细胞内有五种DNA聚合酶;真核细胞DNA复制示意图;八、DNA损伤的修复;DNA突变可能导致肿瘤的发生:;DNA损伤的修复机制:;MutS识别并结合与碱基错配处;第62页/共71页;(二) 碱基的切除修复;???三）核苷酸的切除修复;核苷酸切除修复（2）;（四）直接修复（1）;直接修复（2）;（五）重组修复;（六）SOS反应和诱导修复（易错修复）;生物化学;感谢观看！