大肠菌群检测(三)重点.pptxVIP

实训目的;实训仪器与设备;实训步骤; LST肉汤 BGLB肉汤 结果 1：10 产气 产气 阳性 1：100 产气 产气 阳性 1：1000 产气 产气 阳性;2、BGLB液体接种 将产气的LST肉汤培养基进行液体接种。 在酒精灯上灼烧接种环，从LST肉汤培养基中挑取一环菌液，接种于BGLB肉汤培养基中，36℃培养48小时后。观察产气情况。;液体接种操作要点： 1、操作前消毒 2、接种环灼烧完全，镍丝要烧红。 3、棉塞夹于拿接种针手的无名指和小指之 间 4、翻开棉塞后试管口要在酒精灯旁，防止杂菌进入。;;1、观察试管内的小倒管，如果小倒管有气泡存在或者小导管上漂，说明试管产气。 2、首先点燃酒精灯，在酒精灯旁进行操作。其次接种前充分灼烧接种针，将镍丝烧红为止。接种时将试管放于酒精灯上方火焰外焰处，棉塞加于无名指和小指之间。 3、吸量管在使用前进行灼烧，拿管要求远离实训服，使用前检查是否包扎完好无玻璃外露。;思考题： 1、大肠菌群检测流程 2、回忆初发酵试验步骤 3、大肠菌群检测涉及到几种培养基？LST肉汤培养基的制备步骤、配方是什么？ ;2、初发酵实验步骤 1〕称取25g固体样品，参加225mL无菌水中，均质制备成1：10 样品溶液。 2〕用1只1mL无菌吸量管吸取1：10样品溶液，用无菌方法各取1mL，分别参加到3只LST肉汤培养基中。 3〕吸取1mL1：10样品溶液，参加到装有9mL无菌试管中摇匀，制备成1：100样品溶液。 4〕换1只吸量管各取1mL1：100溶液，参加到3只LST肉汤培养基中。 5〕吸取1mL1：100样品溶液，参加到装有9mL无菌试管中摇匀，制备成1：1000样品溶液。 6〕换1只支吸量管各取1mL1：1000溶液，参加到3只LST肉汤培养基中。 7〕36度±1度，48小时±2小时培养后观察;3、2种培养基，LST肉汤培养基和BGLB肉汤培养基。 LST肉汤培养基：胰蛋白胨或胰酪胨 20.0 g氯化钠 5.0 g 乳糖 5.0 g 磷酸氢二钾〔K2HPO4〕 2.75 g 磷酸二氢钾〔KH2PO4〕 2.75 g 月桂基硫酸钠 0.1 g 蒸馏水 1 000 mL pH 6.8±0.2 将上述成分溶解于蒸馏水中，调节 pH。分装到有玻璃小倒管的试管中，每管10 mL。121 ℃高压灭菌15 min。;内容总结