PCT临床意义分析和总结.docxVIP

. . . . PCT 检测与临床意义1 简介 PCT 是血清中存在的无激素活性的降钙素（calcitonin，CT）前肽物质， 是由 116 个氨基酸组成、相对分子量为 13000KD 的糖蛋白。PCT 的体半衰期为25－30h。正常情况下，PCTmRNA 在甲状腺滤泡旁细胞粗面质网翻译成含 141 个氨基酸残基的前 PCT，分子质量约为 16000KD，包括 N 端 84 个氨基酸（含25 个氨基酸的信号肽）、活性 CT（32 肽）和下钙素（katacalcin，21 肽）三部分，前两部分由 2 肽（-Lys-Arg-）连接，后两部分被 4 肽（-Gys-Lys-Lys-Arg-） 隔开。前 PCT 进入质网膜，经糖基化和特异性酶切除 N-末端的信号肽，生成含116 个氨基酸残基的 PCT，后依次经不同的蛋白水解酶酶解，先切除含 1-57 氨基酸残基的 N 端肽（N-PCT），最后酶解生成 T 和下钙素。 2．PCT 检测原理 PC 测定结合一步免疫夹心法和最后的酶联荧光分析（ELEA）。在分析固相包被针（SPR）既起移液装置的作用外，又起固相作用。测试时，仪器将样本滴入包含被碱性磷酸酶标记的抗体结合孔中。样本偶联物进出 SPR 循环多次，使PCT 结合固定在涂有单克隆鼠抗降钙素原免疫球蛋白的 SPR，与免疫球蛋白偶联形成治.末结结合合部分在清洗步骤中被洗去，然后执行两个检测步骤，在每步中，底物 4－甲基伞形酮酰磷酸脂循环进入 SPR，酶将底物水解为荧光物质，在450nm 处可被测出，荧光强度和样本中抗原的浓度成正比。根据定标曲线可得出样本中 PCT 的浓度。 3．PCT 试剂条说明 3．PCT 试剂条说明 孔 孔 试剂 1 样品孔 2 空孔 ,3,4 5 结合物：碱性磷酸酶标记的小鼠单克隆抗人降钙素原免疫球蛋白+防腐 剂（400ul） 6 TRIS NaCl(PH7.3)+防腐剂（600ul） ,7,8 9 空孔 1 装有底物的检测读数比色槽：4－甲基伞形酮酰磷酸脂+二乙醇胺+叠氮 0 钠 4.PCT 的测量方法及参考围 4.PCT 的测量方法及参考围 曾用放射免疫分析法（RIA）和夹心免疫放射分析法对血浆 PCT 进行测定， 虽然灵敏度较高，但放射性元素的污染致使此方法使用受限。近来 PCT 的检测 方法已改进为双抗夹心免疫发光法。此方法可排除交叉反应；提高特异性，同时 也有很高的灵敏度（0.lug/L）。健康人血浆 PCT 含量极微（0.1ug/L）。 0.5ug/L 被认为是感染性疾病诊断的分界值。但值得注意的是，新生儿出生后两天血浆 PCT PCT 生理性升高，最高达 21ug/L，3 d 后很快下降至成人水平。因此对新生儿而 言，要求建立年龄依赖性参考值。有文献报道通过受试者工作特性曲线（ROC） 统计分析，报道在出生后第一天对新生儿全身严重细菌和真菌感染辅助诊断的 PCT 分界值为 1.5ug/L，第二天的分界值为 10ug/L。不同疾病患者血浆 PCT 的浓 度水平见下表。 表 1 不同人血浆 PCT 的医学决定水平 对象 对象 PCT (ng/ml) 健康人 0.5 慢性炎症反应和自身免疫 0.5 疾病 病毒感染 0.5 轻微至中度局部细菌感染 0.5 SIRS，多发伤，烧伤 0.5-2 严重细菌感染，脓毒症， 2(通常 MODS 10-100) 5．PCT 检测临床意义 5．PCT 检测临床意义 许多学者研究发现，严重全身性细菌、真菌和寄生虫感染时，PCT 异位 生成，有文献报道，PCT 主要产生场所在肝脏，其他如外周血单核细胞，脾，肺 或小肠的神经分泌细胞也是产生 PCT 在重要场所，细菌毒素和炎症因子可刺激PCT 释放，健康志愿者静脉注射小剂量细菌毒素（LPS）也可诱导 PCT 生成。LPS 注射后 2h 血浆中可检测到 PCT，6-8h PCT 浓度快速升高，12-48h 达到峰值， d 后恢复正常 。PCT 水平异常升高。且升高的程度与感染严重度及预后相关。在全身性细菌感染和脓毒症辅助和鉴别诊断、预后判断、疗效观察方面有很高的临床价值如下： 全身严重细菌感染和脓毒症，PCT 升高。 新生儿脓毒症 在新生儿脓毒症辅助诊断方面， PCT 和 hs-CRP 早期出现的敏感性低于 IL-6，特异性显著高于 IL-6，提示误诊率低，但漏诊率相对高。而 IL-6 早期出现的敏感性显著高于 PCT 和 hs-CRP，但特异性差，提示漏诊率低， 但相对误诊率高(见表 2) IL-6 是具有多种生物活性的细胞因子，相对分子量为Mr26000。它是由 212 个氨基酸组成的多功能糖蛋白，机体受炎症刺激后由 T 细胞，B 细胞，单核-巨噬细胞及皮细胞等分泌的，敏感性高。但国外资料表明， 除细菌因素外，其它非感染因素也