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基因组测序原理 自1977年，桑格测定了第一个基因组序列(噬菌体X174的，全长5375个碱基)开始，基因测序技术已经发展到了第三代，转录组测序的研究对象为特定细胞在某一功能状态下所能转录出来的所有RNA的总和，主要包括mRNA和非编码RNA。支撑基因组测序的共有一下几大技术：Sanger双脱氧末端终止法、PCR技术，这里主要介绍一下第一种技术。 Sanger双脱氧末端终止法：其基本原理即双脱氧核苷三磷酸(ddNTP)缺乏PCR延伸所需的3-OH，因此每当DNA链加入分子ddNTP，延伸便终止。每一次DNA测序是由4个独立的反应组成，将模板、引物和4种含有不同的放射性同位素标记的核苷酸的ddNTP分别与DNA聚合酶混合形成长短不一的片段，大量起始点相同、终止点不同的DNA片段存在于反应体系中，具有单个碱基差别的DNA序列可以被聚丙烯酰胺变性凝胶电泳分离出来，得到放射性同位素自显影条带。依据电泳条带读取DNA双链的碱基序列，如下图。 Sanger双脱氧末端终止法测序原理rijgracg。nt另外，大规模基因组测序有两种方法：逐步克隆法与全基因组霰弹法。部序井云疔|］成0*列也波液靴演克隆云-?:新定位克隆原理 rijgracg。nt 另外，大规模基因组测序有两种方法：逐步克隆法与全基因组霰弹法。 部序井云疔 |］成0* 列也波 液靴演克隆 云-?:新 定位克隆（positoinalc