布鲁氏菌实验室检验.pptxVIP

布鲁氏菌实验室检验第1页/共47页第2页/共47页主要内容：1、布鲁氏菌病原学；2、布鲁氏菌诊断标准；3、布鲁氏菌血清学实验的几种方法。第3页/共47页（一）布氏菌概述 1887年英国医生布鲁氏首先从死于“马尔他热”的英国士兵脾脏中分离出羊种布氏菌后，布鲁氏菌属（Brucella)，包括6个种19个生物型。 羊种布氏菌（Br melitensis) 牛种布氏菌（Br abortus) 猪种布氏菌（Br suis) 沙漠森林野鼠种布氏菌（Br neotomae) 绵羊附睾种布氏菌（Br ovis) 犬种布氏菌（Br canis) 第4页/共47页年份菌名发现人国家宿主1887羊种菌Bruce马尔他羊1897牛种菌Bang丹麦牛1914猪种菌Traun美国猪1953绵羊附睾种菌Buadle新西兰公绵羊1956沙漠森林鼠种菌Stoennen美国沙漠森林野鼠1966犬种菌Carmichael美国小猎犬布鲁氏菌的发展史第5页/共47页（一）病原学概述布鲁氏菌属（Brucella) 包括6个种19个生物型。 牛种布氏菌（Br abortus) ： 1、2、3、4、5、6、7、9型 羊种布氏菌（Br melitensis) ：1、2、3型 猪种布氏菌（Br suis) ： 1、2、3、4、5型 沙漠森林野鼠种布氏菌（Br neotomae) 绵羊附睾种布氏菌（Br ovis) 犬种布氏菌 （Br canis) 第6页/共47页1、形 态布鲁氏菌是一组微小的球状、球杆状、短杆状细菌；宽约0.3—0.5微米、长0.6—1.5微米。电镜下见到的羊种菌为明显的球杆状、牛种菌和猪种菌为短杆状；6种布鲁氏菌靠形态很难区分，一般来说，羊种菌最小，牛种菌产次之，猪种菌较大；布鲁氏菌没有鞭毛，不形成芽胞和夹膜。第7页/共47页2、染 色涂片染色检查多为单个排列，少见成对短链排列。布鲁氏菌可被碱性染料着色；革兰染色阴性；柯兹罗夫斯基提出用0.5%沙黄水溶液染色，加热出现气泡，水洗后用0.5%孔雀绿或1%美兰复染，布鲁氏菌呈红色，其它细菌呈绿色和兰色。第8页/共47页布鲁氏菌： 革兰阴性， 长约0.6-1.5μm, 宽约0.3-0.6μm, 用柯氏染色染成红色,无鞭毛、不形成芽胞和荚膜。第9页/共47页3、培养特性1.布鲁氏菌培养营养要求高： 需要各种氨基酸和各种金属离子，有的菌种需要血清才能生长。2.生长缓慢：一般需经4—6天，有的甚至21—30天才能长出菌落。3.生长所需温度：20—40℃，最适为37℃,超过42℃则不生长。4. C02: 绵羊附睾种菌和牛种菌的某些生物型菌需严格的C02(5～10％)。 第10页/共47页（4） 细菌变异布氏菌在各种理化因素作用下易发生变异;即从光滑型（S）变为非光滑型——粗糙(R)或粘液(M)状。变异菌落常比光滑型稍长，表面有颗粒。菌落颜色为灰白色或褐色，第11页/共47页（5） 抵抗力 布氏菌在合适条件下能生存很长时间，有较高的抗灭活能力。对湿热、紫外线和各种射线以及常用的消毒剂、抗生素、化学药物比较敏感；对低温和干燥有较强的抵抗力，故可用冷冻真空干燥法保存菌种。第12页/共47页自然条件生存时间（天）自然条件生存时间（天）水50—120奶油25—65尘4—120奶酪21—90粪21—72冻肉14—47畜舍墙棚?4—150腌肉20—45地面4—150培养基60—318衣服30—80干燥胎膜120皮毛45—120腐败脏器死亡鲜牛乳2—550人工胃液20—50布氏菌在自然条件下的生存能力第13页/共47页 (1)对物理因子的抵抗力 物理因子对布氏菌的影响物理因子 生存时间 物理因子 生存时间湿热56℃ 60分钟以上 干热80℃ 60分钟以上湿热63℃ 60分钟以上 干热90℃ 60分钟以上湿热80℃ 30分钟以上 干热100℃ 7分钟以上湿热90℃ 10分钟以上 直射阳光 1～4小时湿热100℃ 半分钟死亡 散射阳光 7～8天第14页/共47页 (2)对化学因子的抵抗力 化学因子对布氏菌的影响 药物名称 浓度(%) 生存时间 药物名称 浓度(%) 生存时间 新洁尔灭 0.1 30秒钟 漂白粉 0.2～2.5 2分钟以内 石炭酸 1～2 1～5分钟 红 汞 2 7分钟 来苏儿 2 1～3分钟 过锰酸钾 0.1～0.2 7～15分钟 来苏儿 3 1分钟以内 甲