第十二章基因工程与蛋白质工程.pptVIP

（2）放射性探针检测法 利用mRNA可与相应的DNA段落杂交，来检测有外源DNA插入的重组体，是一种快速而灵敏的方法。 第三十页，共四十五页。 第三十一页，共四十五页。 （3）R-环检测法 在有利于形成R-环的条件下，使待检测的纯化的质粒DNA，在含有mRNA的缓冲液中局部变性。如若质粒DNA存在着与mRNA探针互补的序列，mRNA就会取代DNA中一条链，与另一条链形成双链杂交分子，从而形成R-环结构，在电子显微镜下观察，可直接观察到R-环。这样可检出重组体质粒DNA。 第三十二页，共四十五页。 （4）免疫测定法 免疫法测定只能是所转移外源DNA必须表达后才能进行，而且必须具备有效的特异性抗体。 第三十三页，共四十五页。 第三十四页，共四十五页。 Southern和Western印迹法 DNA frangment Electrophoresis Transfer of DNA by blotting 32P-labled DNA probe Autoradiography Agarrose gel Autoradiogram Nitrocellulose sheet Autoradiogram Polymer sheet SDS-Polyacrylamide gel Transfer protein Add radiolabled