二零二三年 优质公开课核酸性质.ppt

退火温度=Tm-25℃ 复性影响因素: 片段浓度/片段大小/片段复杂性(重复序列数目)/溶液离子强度 特点:紫外吸收减少 减色效应:DNA复性过程中,紫外吸收减少的现象 常用的复性方法:退火 复性过程 DNA复性 DNA片段分子量越大复性越难; DNA浓度越大,复性越容易; DNA复性也与它本身组成和结构有关 (具有很多重复序列DNA,复性快)。 减色效应(低色效应) —— 复性时紫外吸收减少的现象 (三)核酸的杂交 将不同来源的DNA放在试管里,经热变性后,慢慢冷却,使其复性。若这些异源DNA之间在某些区域有相同的序列,则复性时,会形成杂交DNA分子。 DNA与互补的RNA之间也可以发生杂交。 杂交:不同来源的核酸经变性和复性的过程,其中一些不同的核苷酸单链由于存在局部碱基互补片段,而在复性时形成杂化双链,此过程称分子杂交。 包括 DNA—DNA 杂交 DNA—RNA 杂交 RNA—RNA 杂交 原因:不同核酸的碱基之间可以形成碱基配对. 用途:是分子生物学研究与基因工程操作的常用技术. DNA-DNA 杂交双链分子 变性 复性 不同来源的DNA分子 变性、复性和杂交之间的关系 特别提示 1、紫外吸收性,与蛋白质合起来考。为何260nm具紫外吸收性?280nm代表什么意思? 2、核酸的变性与复

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