基于CRSIPR技术构建RICTOR基因敲除细胞株的方法及其应用.pdfVIP

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2023-05-15 发布于北京
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基于CRSIPR技术构建RICTOR基因敲除细胞株的方法及其应用.pdf

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本发明涉及基于CRSIPR技术构建RICTOR基因敲除细胞株的方法及其应用，属于生物技术领域，所述方法包括：首先设计用于RICTOR基因敲除的sgRNA，合成sgRNA‑RICTOR‑F和sgRNA‑RICTOR‑R两种引物序列；将合成的两条核苷酸链经退火形成双链，并与载体质粒连接，验证正确后获得重组真核表达质粒；将经构建的重组真核表达质粒转染DF‑1细胞，经筛选、验证，获得RICTOR基因敲除细胞株。该基因敲除细胞株DF‑1ΔRICTOR与DF‑1正常细胞株在细胞活性上没有显著的差异，且传代稳

(19)国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 CN 114703191 A (43)申请公布日 2022.07.05 (21)申请号 202210409294.8 (22)申请日 2022.04.19 (71)申请人华南农业