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大肠杆菌基因组 DNA 得提取
一、传统法提取大肠杆菌基因组 DNA 。
1、实验原理
提取 DNA 得一般过程就是将分散好得组织细胞在含十二烷基硫酸钠(SDS)
与蛋白酶Ｋ得溶液中消化分解蛋白质,再用酚与氯仿/异戊醇抽提分离蛋白质,得
到得 DNA 溶液经乙醇沉淀使ＤNA 从溶液中析出。
ＳDS 得作用机理就是由于其能结合蛋白,中与蛋白得电性,使蛋白质得非共
价键受到破坏,失去二级结构,从而变形失活,蛋白酶 K 或链霉蛋白酶Ｅ均为光谱
蛋白酶,其重要特性就是能在ＳDS 与ＥDT Ａ(乙二胺四乙酸二钠)存在得情况下
保
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