工业发酵灭菌.pptxVIP

工业发酵灭菌;1、在发酵生产中，为什么要进行灭菌操作？ 2、为防止杂菌的污染，哪些物品需要灭菌？ 培养基、发酵设备、空气、管道、流加料等 3、什么时候进行灭菌？ 生产菌接种前 ;常用灭菌方法： 干热灭菌、湿热灭菌、射线灭菌（射线、微波等）、化学灭菌（各种化学药品）、过滤除菌； 1、干热灭菌法 灼烧灭菌、在电热或红外线在设备内加热 主要用于保持干燥的物料、器具等. 常用烘箱，灭菌条件为在160℃下保温1h;2、湿热灭菌法;湿热灭菌的原理;湿热灭菌的优点：;3、射线灭菌;4、化学药品灭菌法; 1、湿热灭菌中的相关定义 致死温度：杀死微生物的极限温度。 致死时间；在致死温度下，杀死全部微生物所需的时间。在致死温度以上，温度愈高，致死时间愈短。 微生物的热阻：是指微生物在某一特定条件（主要是温度和加热方式）下的致死时间。 相对热阻是指某一微生物在某条件下的致死时间与另一微生物在相同条件下的致死时间的比值。;问题;一级反应： 用N表示残留活菌个数，则活菌的减少率（死亡率），与N呈线性关系，即： 式中，K是反应速度常数，对灭菌来讲，是活菌的比热致死速率常数，单位是min-1 ，其值与菌的种类和加热温度有关，需通过实验才能测定。;;;3、热致死反应的速度常数K K是表达微生物耐热性的特征常数 ，与微生物的种类和灭菌温度有关。K越小，微生物越耐热。温度越低， K值越小。 ;;;培养基灭菌的要求： 达到要求的无菌程度（10-3） 尽量减少营养成分的破坏，在灭菌过程中，培养基组分的破坏，是由两个基本类型的反应引起的： 培养基中不同营养成分间的相互作用； 对热不稳定的组分如氨基酸和维生素等的分解。;培养基湿热灭菌需解决的工程问题;A---比例常数，也称阿累尼乌斯常数，s-1； R---气体常数，8.314J/mol·K； T---绝对温度，K； ΔE---微生物死亡活化能，J/mol。 ;（5）;K`---培养基内易被破坏成分的分解速率常数； A`---频率常数，也称阿累尼乌斯常数，s-1； R---气体常数，8.314J/mol·K； T---绝对温度，K； ΔE`---培养基成分分解所需活化能，J/mol。 ;;;问题;四、影响培养基灭菌的其他因素;五、分批灭??和连续灭菌;2、灭菌时间的计算 ;例：有一发酵罐内装40m3培养基，在121 ℃温度下进行实罐灭菌。原污染程度为每1mL 有2*105个耐热细菌芽孢，121度时灭菌速度常数为1.8min-1。求灭菌失败机率为0.001时 所需要的灭菌时间。 ;3、分批灭菌的操作 ;3、分批灭菌的操作 ;4 保证间歇灭菌成功的要素 内部结构合理(主要是无死角)，焊缝及轴封装置可靠，蛇管无穿孔现象 压力稳定的蒸汽 合理的操作方法。;4、分批灭菌的注意事项 1）各路蒸汽进口要畅通，防止短路逆流；罐内液体翻动要剧烈，以使罐内物料达到均一的灭菌温度。 2）排气量不宜过大，以节约蒸汽 3）灭菌将要结束时，应立即引入无菌空气以保持罐压，然后开夹套或蛇管冷却，以避免罐压迅速下降产生负压而吸入外界空气，或引起发酵罐破坏。 4）在引入无菌空气前，罐内压力必须低于过滤器压力，否则培养基将倒流入过滤器。;（二）、连续灭菌 ;发酵罐;2、连续灭菌的优点： 1）可以采用高温短时灭菌； 2）发酵罐利用率高； 3）蒸汽负荷均衡； 4）热效率高； 5）可采用自动控制，降低劳动强度；;3、连续灭菌时间的计算 ;;;;六、间歇灭菌与连续灭菌的比较 ;七、培养基与设备、管道灭菌条件 1、灭菌锅内灭菌 2、种子培养基实罐灭菌 3、发酵培养基实罐灭菌 4、发酵培养基连续灭菌 5、消泡剂灭菌 6、补料实罐灭菌 7、尿素溶液灭菌;;［例3-1］;［例3-2］;［例3-3］;感谢观看！