光与光合作用.docx

专题二 细胞代谢 专题聚焦四 光与光合作用一、叶绿体中色素的种类、提取与分离 叶绿素和其他色素 色素种类 叶绿素（3/4） 类胡萝卜素（1/4） 叶绿素 a 颜色 蓝绿色 叶绿素 b 黄绿色 胡萝卜素 橙黄色 叶黄素 黄色 分布 吸收光谱 化学特性分离方法 叶绿体基粒的囊状结构薄膜上 叶绿素 a 和叶绿素 b 主要吸收蓝紫光和红光，类胡萝卜素（胡萝卜素和叶黄素）主要吸收蓝紫光 不溶于水，能荣誉酒精、丙酮和石油醚等有机溶剂纸层析法 叶绿体中色素的提取和分离 原理： 提取：叶绿体中的色素易溶于有机溶剂而不溶于水，将叶片磨碎后可用无水乙醇等有机溶剂提取色素。 分离：层析也是一种脂溶性很强的有机溶剂，不同色素在层析液中的溶解度不同：溶解度打的在滤纸上扩散得快，溶解度小的随层析液在滤纸上扩散得慢。因此，叶绿体中的色素就在扩散过程中被分离出来。 实验中集中化学物质的作用 ① 无水乙醇：作为提取液，可溶解绿叶中的色素。 ② 层析液：用于分离色素。 ③ 二氧化硅：破坏细胞结构，使研磨充分。 ④ 碳酸钙：中和研磨过程中释放出的酸性物质，从而防止叶绿体中的色素被破坏。 实验流程 步骤 步骤 提 取 色素 制 备 滤纸条 画 滤 液 细线 操作要点 说明 加少许SiO 和CaCO 、10mL 无水乙醇， ①加 SiO 为了研磨得更充分； 2 3 色 素 分 离 观 察 结果 迅速研磨并用单层尼龙布过滤 在剪去两角的滤纸条一端1cm 处用铅笔画一条细线 用毛细吸管吸取色素滤液，沿铅笔线均匀画一条滤液细线，待滤液干后再画一两次 将适量层析液倒入试管→插入滤纸条→棉塞塞紧试管口 滤纸条上呈现四条颜色、宽度均不相 同的色素带 2 ②加 CaCO 防止研磨时叶绿素受到破坏 3 剪去两角以保证色素在滤纸上扩散均匀、整齐，否则会形成弧形色素带 ①滤液细线要细、直 ②干燥后重复画一两次，既使滤液细线有较多的色素，又使各色素扩散的起点相同层析液一定不能没过滤液细线 色素带由上至下：胡萝卜素（最细）、叶黄 素（二细）、叶绿素 a（最粗）、叶绿素 b （次粗） 叶绿体色素提取分离实验异常现象分析： ① 收集到的滤液绿色过浅的原因分析： 未加石英砂（SiO ），研磨不充分。 2 使用放置数天的菠菜叶，色素太少。 一次加入大量的无水乙醇，提取浓度太低（正确做法：分次加入少量无水乙醇提取色素） 未加 CaCO 或加入过少，色素分子被破坏。 3 ②滤纸条色素带重叠：滤纸条上的滤液细线接触到层析液。 ③滤纸条上不见色素带 忘记画滤液细线 滤液细线接触到层析液，且时间较长，色素全部溶解到层析液中。 层析时间过长，导致色素随层析液蒸发。二、光合作用的原理及应用 光合作用发现史中的经典实验分析 （1）1771 年普里斯特利实验植物更新空气 缺点：缺乏对照实验(记录时漏掉了实验在阳光下进行这一重要条件，后来英格豪斯为其纠正) （2）1864 年萨克斯实验 提前暗处理——目的：消耗掉叶片中原有的淀粉，避免干扰实验过程、现象（结果） 实验组：一半曝光 脱色处理 ??呈深蓝色?? 光下产生淀粉 对照组：一半遮光 碘蒸――气→处理?不变蓝色? （运用对照实验） ?? ?? （3）1880 年恩格尔曼实验 水绵 ??黑暗、无空气 ? ――→ 好氧细菌?? 显微镜观察 ??极细光束照射叶绿体―→好氧细菌集中在照光处 ? ??完全曝光―→好氧细菌集中在带状叶绿体处 实验组：极细光束照射处的叶绿体 对照组：黑暗处的叶绿体和完全曝光的叶绿体恩格尔曼的实验设计巧妙之处 ①选材方面，选用水绵为实验材料。水绵不仅具有细长的带状叶绿体，而且叶绿体呈螺旋状地分布在细胞中，便于观察、分析研究。 ②将临时装片放在黑暗并且没有空气的环境中，排除了光线和氧气的影响，从而确保实验正常进行。 ③选用了极细光束照射，并且选用好氧细菌检测，从而能够准确判断出水绵细胞中释放氧的部位。 ④进行黑暗(局部光照)和曝光对比实验，从而明确实验结果完全是光照引起的。 （4）20 世纪 30 年代鲁宾、卡门实验实验方法：同位素标记法 特别提醒 在光合作用的发现中，大多数科学家们利用了对照实验，使结果和结论更科学、准确。(1)萨克斯：自身对照，自变量为光照(一半曝光与另一半遮光)，因变量为颜色变化。(2)恩格尔曼：自身对照，自变量为光照(照光处与不照光处；黑暗与完全曝光)，因变 量为好氧菌的分布。 鲁宾和卡门：相互对照，自变量为标记物质(H18O 与 C18 O )，因变量为 O 的放射性。 2 2 2 过 程光反应暗反应 过 程 光反应 暗反应 图 解 条 件 必须在光下 有光、无光都可以 场 所 叶绿体类囊体薄膜 叶绿体基质 ①水光解 ③CO 的固定 CO ＋C →2C 2H O→4[H]＋O ↑ 2 2 ④C 的还