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- 2023-05-19 发布于四川
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结构类似物抗性菌株的获得方法:
就是将诱变处理的野生型菌株涂布在含有末端代谢产物的结构类似物的琼脂平板上, 培育一段时间之后大多数细胞被杀死,而那些形成了抗性突变的君主则形成了菌落,从而 得到不受末端代谢产物调整作用的突变株。
机制如下:细胞中过度代谢产物(氨基酸A )会抑制和阻遏参加其生物合成途径的酶。 氨基酸A可用于蛋白质的合成,氨基酸类似物A* (又称抗代谢物),具有与氨基酸A一样 的调整作用,但不能用于合成蛋白质。经诱变处理的野生型在含有氨基酸类似物A*的培育 基中培育时,由于绝大多数细胞不能合成氨基酸A而死亡,只有那些对类似物A*不敏感的 抗性突变菌株能合成氨基酸A ,方能形成菌落。在这些突变菌株中,有些可能是由于参加 氨基酸合成的酶结构起了变化,对类似物A*不敏感(抗反馈抑制的突变株),另一些可能 是编码参加氨基酸A合成酶的操纵子掌握基因发生了突变,编码出没有活性的调整蛋白而 对类似物A*不敏感(抗反馈阻遏的突变株1由于这些君主对氨基酸A的合成失去掌握, 从而能过度的生产氨基酸Ao
如筛选能抗苏氨酸的结构类似物a-氨基平-羟基戊酸的黄色短杆菌的突变株获得苏氨 酸过度合成型菌株。
当然,此种方法还可用于过度合成瞟吟、口密咤、维生素。
津~筛选抗性突变株的结构类似
积累的产物
. .结构类似物
积累的产物 |
结构类似物
苏氨酸(14g/L)
酪氨酸
脯氨酸
缴氨酸
亮氨酸
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