酶活,糖,蛋白,叶绿素含量测定方法总结.docVIP

生理实验方法总结 酶提取液制备 称取干净叶片0.5g于预冷研钵中，加2ml的 提取介质﹙PH7.8的50 mmol·L-1磷酸缓冲液﹚，充分研磨后，加提取介质冲洗钵体，并使最终体积为5ml，6000rpm离心30min，上清液即为提取液。供SOD、CAT、POD、MDA和蛋白质含量测定。 1、叶片相对含水量： 先求叶片鲜重Wf，然后将叶片浸入蒸馏水中数小时（要48h左右叶片质量才不会增加），使叶片吸水成饱和状态。取出用吸水纸吸取表面的水分，立即放入已知重量的称瓶中称重，再放入蒸馏水中一段时间后取出吸干外面水分，再称重，直至重量不再增加为止。此时即为叶片吸水饱和时的重量Wt，再将样品烘干，求得组织干重Wd， 即得相对含水量=（Wf-Wd）/（Wt-Wd）×100% 注：Wf——叶片鲜重（g）；Wd——叶片干重（g）；Wt——叶片饱水重（g）。 2、比叶重： 单位面积的叶片的干重，避开主脉。 3、相对电导率： 取大小相当的植物叶片(尽量保证叶片的完整性,少含茎节),用自来水洗净后再用蒸馏水冲洗3次,用滤纸吸干表面水分,将叶片剪成适宜长度的长条(避开主脉),快速称取鲜样3份,每份0.1g,分别置于10ml去离子水的刻度试管中,盖上玻璃塞置于室温下浸泡处理12h.用电导仪测定浸提液电导(R1),然后沸水浴加热30min,冷却至室温后摇匀,再次测定浸提液电导(R2).相对电导率=R1/R2