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园艺植物组织培养;内 容(4学时);培养室;小鳞芽反绿后开始生长生根 ;第一节 概说;植物组织培养作为一门生物技术近30年发展迅速,广泛应用于农业、园艺、林业、医药。农业生产中进行优良植物种类的快速繁殖,脱除病毒和辅助育种等,并产生巨大的经济效益。现代农业必须用生物技术“提升”,“植物组织培养”就是用生物技术提升农业的重要科学手段。;园艺植物离体无性繁殖;园艺植物离体无性繁殖的意义(优越性);手指玫瑰 ;菊花的组培快繁;(二)诱导、继代培养
在无菌条件下,用剪刀将外植体茎段切成0. 5~1 cm 长小段,水平放置接种;叶片切成5mm×5mm小块,下表皮朝下水平放置接入初代培养基中,接种完成后即转入培养室进行初代培养,培养温度22~28 ℃,光强1000~4000 Lx。;1.间接再生途径
茎段和叶片接种到培养基上,均可以从一周内,明显可以看到茎段和叶片开始膨大。20d后产生愈伤组织,30d愈伤组织分化出芽。
2.直接再生途径
茎段和叶片接种到培养基上,均可以从一周内,明显可以看到茎段和叶片开始膨大。但是20d后不产生愈伤组织,直接分化出芽。;菊花再生植株;第14页/共81页;(三)生根、移栽
当培养基中的植株出芽后,再将其转入到生根培养基中,诱导其生根。或通过无根嫩茎扦插生根。
; 1.试管生根
切取3cm左右无根嫩茎,转插到1/2MS+NAA0.1培养基中,经两周即可生根,然后移栽驯化。移栽初期保持高湿度条件,营养钵基质浇透水,取出生根的试管苗,洗掉附加在根部的培养基,用竹签在基质上打一小孔,将幼苗插入基质中。然后家设小拱棚以保湿,随着幼苗的生长,逐渐降低空气湿度和基质含水量,转为正常的管理阶段。; 2.扦插生根
利用菊花无根嫩茎易于生根的特点,也可免去试管生根这道程序。剪取2~3cm无根苗,插植到珍珠岩或蛭石的基质中,基质事先用生根激素溶液浸透,10d后生根率可达95%~100%。
;菊花炼苗;第19页/共81页;园艺植物离体无性繁殖的方式; 器官发生型(organogenesis type):;无菌母株制备;芦荟组织培养快速繁殖;繁殖方法;繁殖方法;生根培养
材料 3cm高的幼苗
培养基 生根培养基
培养条件 同愈伤培养
培养时间 15d
炼苗
选材 苗高5~10cm,健壮
清洗培养基,喷水
条件 15 ℃~25℃,60%~80%湿度,12~24h
移栽
移入驯化苗圃(蛭石组成) 15~20d
移入苗圃;胚状体发生型(embryogenesis type):;;合子心型胚 正在萌发的体胚;针叶松体细胞胚及体胚萌发生长;花椰菜体胚发育的不同阶段;菊花花瓣体细胞胚胎发生及体胚发育过程的扫描电镜观察;不定芽型(adventitious bud type):;第34页/共81页;器官型(organ type);原球茎型(protocorm type);原球茎:兰科植物组织培养中形成的一种特殊的中间繁殖体,是呈珠粒状、由胚性细胞组成、基部生假根、类似嫩茎的器官。圆球茎可以增殖形成原球茎丛。;球茎芽型 ;块茎型 ;鳞茎型 ;孢子型 ;根茎型 ;微枝扦插型 ; 1、快繁
利用适宜的植物材料(外植体),通过组织培养的途径,使之分生出新的植株个体,即为组培苗。这种繁殖方式称为微繁或快繁。;;(1)培育单倍体;花药培养:把发育到一定阶段的花药接种在人工培养基上,使其发育和分化成植株的过程
花粉培养:从花药中分离出花粉粒使之成为分散或游离的状态,通过培养使其脱分化并发育成植株的过程;目的是获得单倍体植株
迅速获得纯合型材料,缩短育种年限
获得育种中间材料
与诱变育种相结合可以提高诱变频率
与细胞融合相结合,使这一育种途径更具有实际应用意义
作为遗传工程受体更为有效
用作基础遗传研究的各个领域; 培养方法
花药看护培养
花粉悬浮培养
固液双层培养;花粉或小孢子的分离;第51页/共81页;7天; 一、胚培养的类型:
分为成熟胚培养和幼胚培养两种。;第四章 胚胎培养和胚乳培养;中国学者在裸子植物胚胎培养方面的工作;胚乳培养的意义;第一节 胚胎培养;植物胚胎的发育时期;幼胚的培养;防止幼胚的提前萌发;操作实例和经验;胚胎培养的应用 1;胚胎培养的应用2;第二节 胚乳培养和三倍体的产生;植物胚胎发生过程:
原胚-球形胚-心型胚-鱼雷胚-子叶胚
;第66页/共81页;1、成熟胚培养
成熟胚为子叶期以后的胚,其在简单的培养基上即可萌发生长。对营养条件要求不严格。 主要用来繁殖不易萌发植物,或研究胚和胚乳及子叶的关系等。;台湾红豆杉成熟胚培养;牡丹成熟胚的离体培养与快
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