蛋白质合成及转运生科.pptxVIP

蛋白质合成及转运生科;一、蛋白质的生物合成： ● 合成场所：核糖体. ● 原料：氨基酸、tRNA 、mRNA 、rRNA 其他蛋白因子、ATP、GTP.;粗面内质网;（一）蛋白质合成的分子基础： 1、 mRNA是蛋白质合成的模板： ● 含有三联密码子. ● 阅读方向5’ → 3’. ● 有起始密码AUG和终止密码UAA、UAG、UGA. ● 3’端：真核生物有PolyA尾巴. ● 5’端：决定起始密码的选择. ;2、tRNA转运活化的氨基酸到模板上： ● 每种氨基酸都至少有一种tRNA负责转运. ● 书写方式：tRNAPhe、 tRNASer ● 通常一种氨基酸具有几种tRNA.;第6页/共65页;第7页/共65页;第8页/共65页;tRNA分子的识别位点包括： ● 3’CCA-OH氨基酸接受位点. ● 识别氨酰-tRNA合成酶位点. ● 核糖体识别位点. ● 反密码子结合位点.;Cys*;第11页/共65页;3、核糖体是蛋白质合成的工厂.;第13页/共65页;第14页/共65页;第15页/共65页;氨酰tRNA合成酶;Ⅰ型氨酰tRNA合成酶：催化形成2’形式的酯;氨酰基团在2’ 3’间交换;Ⅱ型氨酰tRNA合成酶：催化形成3’形式的酯;第20页/共65页;第21页/共65页;2、特定的氨酰tRNA合成酶识别： ● 特定的氨基酸. ● 与氨基酸对应的特定的tRNA.;3、氨酰tRNA合成酶的校正功能： ● 水解非正确组合的氨基酸和tRNA.;● 异亮氨酰–tRNAIle ● 缬氨酰–tRNAVal ● 缬氨酰–tRNAIle则被水解：缬氨酸+tRNAIle;4、一个特殊的tRNA启动蛋白的合成： ● 所有蛋白质的翻译都起始于甲硫氨酸（Met）的参与. ● tRNAMet：携带Met掺入蛋白内部. ● tRNAiMet ：携带起始的Met掺入. ● 由同一种tRNA合成酶合成：起始因子识别tRNAiMet 延伸因子识别tRNAMet ;● 原核生物中的第一个蛋氨酸要进行甲酰化 修饰---甲酰Met：;5、翻译起始于mRNA与核糖体的结合： ● 真核生物mRNA分子的5’端有核糖体进入部位: 帽子结构帮助识别mRNA分子与核糖体的结合位点. 核糖体沿着 mRNA分子5’ → 3’扫描至起始密码AUG. ● 真核生物最靠近5’端的AUG序列通常就是起始密码. ;● 原核生物mRNA 5’端的SD序列—识别16S rRNA;第29页/共65页;;6、蛋白因子帮助合成的起始： ● 蛋白质合成的起始、延伸和终止的每一个阶段，都涉及到一组不同的??白质因子的帮助. ● 原核生物（大肠杆菌）： 三个起始因子（initiation factor）：IF1、IF2、IF3 真核生物：更多种的起始因子帮助.;①IF1、IF3与30S小亚基结合：;② fMet–tRNAiMet进入;③50S大亚基的结合;A：新进来的氨基酸结合位点. P：肽链结合位点. E：出口（大部分在大亚基上）.;第36页/共65页;①进位;②转肽：肽酰转移酶（核糖体参与催化）.;第39页/共65页;③移位：EF-G（EF-2）;8、翻译的终止（terminate） ● 没有识别终止密码子UAA、UAG、UGA的tRNA. ● 有核糖体释放因子的协助.;RF1：UAA/UAG RF2：UGA RF3：刺激活性;第44页/共65页;;多核糖体（polysome）：;第47页/共65页;多核糖体与核糖体循环：;9、蛋白质合成的抑制剂：了解.;（1）抗菌素;四环素（土霉素、金霉素） ①作用于细菌30S小亚基，抑制起始复合物形成； ②抑制氨酰tRNA进入核糖体A位，阻滞肽链延伸； ③影响终止因子与核糖体的结合 四环素类抗生素对真核细胞核糖体也有抑制. 但不能通过真核生物细胞膜. 对70S核糖体的敏感性更高.;氯霉素——广谱抗生素： ① 与核糖体A位紧密结合，阻碍氨基酰tRNA进入 ② 抑制肽酰转移酶活性，肽链延伸受到影响.; （2）毒素：;（3）抗代谢物：;（4）干扰素（interferon，IFN）;五、蛋白质的运输及翻译后修饰：;●蛋白质定位：;●信号肽假说简图：;;●分泌蛋白质的合成和胞吐作用：;肽链折叠：指从多肽链的氨基酸序列形成具有正确三维空间结构的蛋白质的过程. 体内多肽链的折叠目前认为至少有两类蛋白质参与，称为助折叠蛋白: （1）蛋白质二硫键异构酶（PDI） （2）分子伴侣.;Lasky于1978年首先提出分子伴侣（mulecular chaperone）的概念，这是一类在细胞内能帮助新生