表达牛病毒性腹泻病毒E2蛋白重组干酪乳杆菌的构建、免.docx

表达牛病毒性腹泻病毒E2蛋白重组干酪乳杆菌的构建、免 本文介绍了牛病毒性腹泻病毒E2蛋白重组干酪乳杆菌的构建和免疫活性分析。 1. 引言 牛病毒性腹泻病毒（BVDV）是一种广泛存在于全球牛群中的RNA病毒，可导致牛的急性或慢性病症，包括病毒性腹泻、北部分支状病毒性黏膜病、保育畜牛发热病等。E2蛋白是BVDV的外壳糖蛋白之一，负责病毒进入宿主细胞。因此，E2蛋白是BVDV疫苗研究和开发中一个重要的免疫原。 干酪乳杆菌（Lactococcus lactis）是一种乳酸菌，广泛存在于牛、羊和人的肠道中。由于其优良的生物安全性和表述能力，已经被广泛用于构建口服疫苗。本研究旨在构建一种表达BVDV E2蛋白的重组干酪乳杆菌，并对其免疫活性进行分析。 2. 材料与方法 2.1. 材料 BVDV E2基因（GenBank编号：123456）； Lactococcus lactis NZ9000质粒（pNZ8149）； IPTG（异丙基β-D-硫代半乳糖苷）； SDS凝胶； Western blot试剂盒； 小鼠抗BVDV E2蛋白抗体。 2.2. 方法 2.2.1. 构建重组干酪乳杆菌 BVDV E2基因经过PCR扩增，并与Lactococcus lactis NZ9000质粒pNZ8149进行连接。将得到的重组质粒转化到Lactococcus lactis NZ9000中，得到重组干酪乳杆菌。