原生质体的培养与融合.pptVIP

1973年：Keller用pH10.5的50 mM CaCl2溶液在37℃时，诱发烟草叶肉原生质体融合。 优点：杂种产量高。 不足：高pH值对细胞有毒害作用。 （二）高pH-高Ca离子法 第三十页，共四十六页，2022年，8月28日 PEG法特点： 融合频率高 可重复性强 诱发融合无特异性 毒性较低 植物+植物 植物+动物 动物+酵母 Polyethylene Glycol（聚乙二醇） （三）PEG法 第三十一页，共四十六页，2022年，8月28日 PEG法原理 PEG是一种带负电性的高分子化合物，在原生质体融合中起到一种桥梁作用，可以使原生质体凝聚。在洗脱过程中，PEG将被洗掉，导致质膜表面电荷重排。粘连的质膜大面积紧密相连，电荷的重排导致一个原生质体的负性电荷部位与另一原生质体的正性电荷部位相连而导致融合。 第三十二页，共四十六页，2022年，8月28日 PEG法示意图 - + - 桥梁 + - PEG被洗掉 + - + - 电荷重排 + - + - + - + - 膜接触 第三十三页，共四十六页，2022年，8月28日 第一页，共四十六页，2022年，8月28日 原生质体的分离与纯化 原生质体培养 原生质体融合 本章主要内容 第二页，共四十六页，2022年，8月28日 原生质体（Protoplast） 含义：去掉细胞壁的由质膜包裹、具有生活力的裸露细胞。 第三页，共四十