项目四微生物培养基的配制.pptxVIP

项目四微生物培养基的配制第1页/共25页 一、培养基的制备1、培养基的概念用人工方法，将多种物质按照各类微生物生长繁殖需要而配制成的混合营养料。2第2页/共25页 2、培养基的分类（1）根据营养成分划分，培养基可以分为天然培养基、合成培养基、半合成培养基。天然培养基合成培养基半合成培养基3第3页/共25页 培养基的种类（根据营养成分划分）名称天然培养基合成培养基半合成培养基成分天然有机物化学试剂天然有机物化学试剂用途异养微生物培养大规模培养实验室研究菌种选育实验室研究工业生产优点配制方便营养全面丰富价格低廉成分精确重复性强部分成分精确营养全面丰富应用广泛缺点成分复杂产品不稳定配制复杂生长慢，成本高4第4页/共25页 （2）根据物理状态划分，培养基可以分为液体培养基、固体培养基、半固体培养基、脱水培养基。液体培养基固体培养基半固体培养基5第5页/共25页 培养基的种类（根据物理状态划分）名称液体培养基固体培养基半固体培养基状态液态固态半固体琼脂含量01.5%~2.0%0.5%~0.8%用途工业化生产生长特征观察应用研究实验室中观察、分离、鉴定、计数、保藏微生物微生物动力观察保藏菌种6第6页/共25页 脱水培养基将各种营养成分按比例配制完全，制成脱水的干粉状，装瓶出售，使用时按比例加入定量的水溶化、灭菌即可。7第7页/共25页 （3）根据用途划分基础培养基：在一定条件下含有某一类微生物生长繁殖所需的基本营养物质的培养基。选择培养基：培养基中含有能杀死或抑制某些微生物的物质。如营养琼脂在营养琼脂中加入青霉素即选择培养基。8第8页/共25页 （3）根据用途划分增菌培养基：加入某些成分，使需要的菌种生长快速。鉴别培养基：微生物经培养后出现某种明显特征，可以借此进行鉴别。增殖培养基大肠杆菌大肠菌群用显色培养基9第9页/共25页 （4）实际使用的培养基形式实际使用的培养基还有这几种形式：干粉培养基、颗粒培养基、即用型培养基、测试片等。颗粒培养基即用型培养基测试片10第10页/共25页 即用型培养基试剂公司配制、灭菌，并进行品质检测，打开即可使用。优点是使用方便，节省人力，特别是少量使用的情况下。11第11页/共25页 测试片也叫纸片培养基，纸片层上固定了显色培养基。检测时把样品溶液加在纸片培养基上，然后培养、观察。12第12页/共25页 3、培养基的成分水营养物质蛋白胨、牛肉膏、酵母膏、麦芽汁、肉浸汁、糖类、血液、血清、无机盐、维生素等凝固剂琼脂、明胶等其他成分抑制剂、指示剂等13第13页/共25页 4、培养基配制步骤培养基配制基本步骤如图，但根据实际作调整。准备称量溶解调节pH分装灭菌14第14页/共25页 （1）配置前的准备了解培养基要求，根据配方进行计算，清洗玻璃器皿，准备试剂药品。15第15页/共25页 （2）称量根据配方，称取所需药品。注意少量、微量物质的称量方法。16第16页/共25页 （3）溶解在容器中加入2/3的水，加热溶解药品，加水至量。顺序：先加缓冲化合物，再加大量元素，再加微量元素。一般无机物应该先少量水溶解再加进去。不能把所有的药品称好后一起加进去溶解！17第17页/共25页 （4）调节pH使用pH试纸/pH计测定其pH，根据需要用盐酸或者氢氧化钠调节，直至达到所需pH值。18第18页/共25页 （5）分装根据实际需要，将培养基分装至锥形瓶、试管等容器。液体分装量为试管高度的1/4左右固体分装量为试管高度的1/5左右半固体分装量为试管高度的1/3左右分装三角瓶以不超过容积的1/2为宜19第19页/共25页 （6）灭菌根据培养基的要求，进行灭菌。不同培养基的灭菌条件可能有所不同，需要注意。如成分中含有乳糖，则可能灭菌温度在115℃。20第20页/共25页 5、配制时还要注意的事项溶解时要看是否有些成分会反应沉淀，例如高氏一号培养基，有铁、镁、磷酸根，一起加进去可能会沉淀。加淀粉时，要先冷水调糊，加热溶解，再将淀粉溶液继续配制培养基。21第21页/共25页 6、斜面制作培养基在灭菌后立即摆放待凝固。斜面长度不得超过试管长度的1/2，以形成2/3底层、1/3斜面为宜。22第22页/共25页 7、无菌检查培养基在37℃下放置一到两天，无污染的即可使用。可以多准备一管或者几管培养基，灭菌后用这管培养基进行无菌试验。23第23页/共25页 8、贮存条件和贮存时间实验室自制的培养基应避光、干燥保存，必要时在5±3 ℃冰箱中保存，平板不宜超过2～4周，瓶装及试管装培养基不宜超过3～6个月。 24第24页/共25页 感谢观看!第25页/共25页