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T淋巴细胞结果的解读全国会吴铁军第1页/共30页第2页/共30页淋巴细胞分化图第3页/共30页T淋巴细胞的分类方法按T细胞所处的活化阶段 初始T细胞(naive T cell) 效应T细胞(effector T cell) 记忆性T细胞(memory T cell)按T细胞表面受体(TCR)分类 ?? + T细胞 ?? + T细胞按T细胞CD4和CD8分子表型 CD4+ T细胞 CD8+ T细胞 按T细胞的功能分类 Th(辅助T细胞) TS(抑制T细胞) Tr(调节T细胞)第4页/共30页外周血中各亚群占淋巴细胞总数的比例60-80%27-51%15-44%T淋巴细胞CD4T淋巴细胞CD8T淋巴细胞第5页/共30页淋巴细胞监测注重数量、比例、功能相结合功能、数量、比例结合4更精确评估机体免疫状态血液分析常规检测13依据白细胞、淋巴细胞比例及计数绑定机体免疫状况,无法精确判断。T淋巴细胞亚群数量观察免疫细胞数值变化,评估免疫状况,通常采用流式细胞仪法,特别针对CD4的检测,已成为“金标准”。2T淋巴细胞亚群比例检测临床常用,但较片面第6页/共30页目前临床主要可以做以下项目的检测淋巴细胞亚群(T+B+NK)的比例和计数T细胞亚群(CD4+细胞、CD8+细胞、CD4+/CD8+比值)MHLA-DR(单核细胞HLA-DR)CD4CD25Treg(调节细胞)及Th17细胞(我们工作)目前国内绝大多数医院没有开展淋巴细胞计数项目第7页/共30页(BD)健康中国人参考范围项 目百分含量(%淋巴细胞)Total B lymphocyte (CD19+) 5-18%NK cell (CD3-/CD16+56+) 7-40%Total T lymphocyte (CD3+) 50-84%T helper/inducer cell (CD3+/CD4+) 27-51%T supressor/cytotoxic cell (CD3+/CD8+) 15-44%CD4/CD80.71-2.78项 目百分含量(% T淋巴细胞)绝对含量(cells/?L)Total T lymphocyte (CD3+)770-2041Thelper/inducer cell (CD3+/CD4+/CD8-)34-70%414-1123Tsupressor/cytotoxic cell (CD3+/CD4-/CD8+25-54%238-874CD3+CD4+CD8+ cell0.5-4.0%6-56第8页/共30页CD4+、 CD8+ T淋巴细胞的计数方法一(FCM)简单、快速、相对精确取100μl全血,加三种不同荧光素标记的鼠抗人CD3、CD4、CD8McAb,阴性对照。加红细胞裂解液,溶血,离心,弃上清。用PBS洗1次,PBS重悬细胞,上机检测。FCM分析 电子计算机自动计算出阳性细胞百分率及总细胞计数。第9页/共30页CD4T淋巴细胞的计数方法二(推算)CD3+T细胞正常范围为:50-84%CD4+T细胞正常范围为: 27-51% CD8+T细胞正常范围为: 15-44%CD19+B细胞正常范围为:5-18%与血细胞计数仪联用,得出各淋巴细胞百分比后乘以淋巴细胞数量,得出各淋巴细胞的绝对浓度。不精确、繁琐举例如下省钱第10页/共30页患者血常规中淋巴细胞计数为0.63 ×109 /L,淋巴细胞比例测定结果CD3 为64.9%,CD4为32.5%,CD8为31.1%推算CD3细胞计数为0.63×109/L×64.9%≈0.41 ×109 /LCD4细胞计数为0.63×109/L×32.5%≈0.20 ×109 /LCD8细胞计数为0.63×109/L×31.1%≈0.19 ×109 /L第11页/共30页第12页/共30页单核细胞人类白细胞抗原DR( CD14/HLA-DR)CD14为LPS复合物受体,主要分布在单核细胞,HLA-DR为活化标志。CD14/HLA-DR可反映人体细胞免疫功能,30%提示免疫麻痹。也有人认为HLA-DR浓度如果连续两天低于8000AB/C可认为存在免疫麻痹。广泛应用于临床。第13页/共30页T淋巴细胞亚群研究研究逐年增多第14页/共30页淋巴细胞亚群变化的常见临床意义CD4淋巴细胞减少:见于恶性肿瘤、遗传性免疫缺陷病、艾滋病、应用免疫抑制剂的患者CD8淋巴细胞增多:见于自身免疫性疾病,如系统性红斑狼疮(SLE)、艾滋病初期、慢性活动性肝炎、肿瘤及病毒感染等CD4/CD8比值异常: 比值降低:一般被称为“免疫抑制”状态,常见于免疫缺陷病、恶性肿瘤、再生障碍性贫血、白血病、某些病毒感染等 比值增高:表明细胞免疫功能处于“过度活跃”状态,容易出现自体免疫反应。此外还可用于监测器官移植的排斥反应,若移植后CD4/CD8较移植前明
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