YC_T 421-2011 烟用添加剂中邻氨基苯甲酸肉桂酯的测定 高效液相色谱法.docx

ICS 65.160 X 85 备案号：34769—2012 中 华 人 民 共 和 国 烟 草 行 业 标 准 YC/T 421—2011 烟用添加剂中邻氨基苯甲酸肉桂酯的测定 高效液相色谱法 Determination of cinnamyl anthranilate in tobacco additives- High performance liquid chromatographic method 2011-12-26发布 2012-01-15实施 国 家 烟 草 专 卖 局 发 布 I YC/T 421—2011 前 言 本标准按照 GB/T 1.1—2009 给出的规则起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。 本标准由国家烟草专卖局提出。 本标准由全国烟草标准化技术委员会烟用材料分技术委员会(SAC/TC 144/SC8)归口。 本标准起草单位：浙江中烟工业有限责任公司、中国烟草总公司郑州烟草研究院、上海烟草集团有 限责任公司、广东中烟工业有限责任公司。 本标准主要起草人：蒋健、周国俊、高阳、肖卫强、王昇、余晶晶、吴达、王申、黄翼飞、周塔、刘建华、 王韵。 1 YC/T 421—2011 烟用添加剂中邻氨基苯甲酸肉桂酯的测定 高效液相色谱法 1 范围 本标准规定了烟用添加剂(香精和料液)中邻氨基苯甲酸肉桂酯的测定方法—-高效液相色谱法。 本标准适用于烟用添加剂(香精和料液)中邻氨基苯甲酸肉桂酯的测定。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 YC/T 145.10 烟用香精 抽样 3 原理 样品中的邻氨基苯甲酸肉桂酯经水、乙醇、1,2-丙二醇的混合萃取剂溶解萃取后，用带荧光检测器 的高效液相色谱仪测定，外标法定量。 4 试剂与材料 4.1 水，符合 GB/T 6682 中一级水的要求。 4.2 乙腈，色谱纯。 4.3 乙醇，分析纯。 4.4 邻氨基苯甲酸肉桂酯，纯度≥99%。 4.5 1,2-丙二醇，分析纯。 4.6 萃取溶剂，水：乙醇：1,2-丙二醇=1:1:1(体积比)。 4.7 标准溶液 4.7.1 标准储备溶液 准确称取20 mg (精确至0 . 1 mg) 邻氨基苯甲酸肉桂酯(4.4),用萃取溶剂(4.6)溶解并移入 200mL 容量瓶中，定容至刻度并摇匀。标准储备溶液在0℃~4℃避光环境下保存，有效期为1个月。 4.7.2 标准工作溶液 根据需要配制合适浓度的邻氨基苯甲酸肉桂酯标准工作溶液。推荐如下配制方法：将标准储备溶 液(4.7.1)以萃取溶剂(4.6)逐级稀释得到系列标准工作溶液，配制示例如表1。即配即用。 2 YC/T 421—2011 表 1 系列标准工作溶液配制 系列标准工作溶液 溶液初始浓度 μg/mL 量取体积 mL 定容终体积 mL 标准溶液终浓度 μg/mL 6# 100 1 10 10 5# 10 5 10 5 4# 5 4 10 2 3# 2 5 10 1 2# 1 5 10 0.5 1# 0.5 4 10 0.2 5 仪器设备及条件 5.1 高效液相色谱仪，配置荧光检测器。 液相色谱柱：C?? 色谱柱，规格：250 mm (长度)×4.6 mm (内径),填料粒度：5.0 μm。 高效液相色谱条件：以下分析条件可供参考，采用其他条件应验证其适用性。 ——流动相 A: 水 ； ——流动相 B:乙腈； ——柱温：35℃; ——流速：1.0 mL/min; ——进样体积：10μL; ——梯度洗脱程序见表2; ——检测器检测波长，λ。(激发波长)为342 nm,λcm(发射波长)为413 nm ——分析时间约为46 min。 表 2 梯度洗脱程序 时间 min A % B % 0 70 30 30 5 95 35 5 95 36 70 30 46 70 30 5.2 分析天平，感量0.1 mg。 5.3 振荡器，最大振荡频率不低于200 r/min。 5.4 有机相微膜过滤器，配0.45 μm 有机滤膜。 5.5 各种规格的移液管、移液枪、容量瓶和具塞锥形瓶。 3 YC/T 421—2011 6 取样 按照 YC/T 145.10 抽取样品。 7 分析步骤 7.1 样品前处理 准确称取0.5 g (精确至0.0001 g) 样品于25 mL 具塞锥形瓶中，加入5 mL 萃取溶剂(4.6),于 150 r/min 转速下振荡萃