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1、三点一次定位法 优点： 一次三点实验中得到的三个重组值是在同一基因型背景，同一环境条件下得到的； 通过三点一次测验可以得到双交换资料； 当三个基因位点中有两个位点的距离相当“接近”时，即重组值很小 ，三点一次定位法必两点三次定位法判断三个基因的顺序准确。 局限性： 三点一次测验法不易得到三杂合体（trihybrid）。 （1）常染色体上的基因定位 例如：乌骨鸡的三个非等位基因 P: ICrF/ICrF × icrf/icrf F1: ICrF/icrf × icrf/icrf F1b1: 白、 毛、卷 ICrF/icrf 361 有色、非、正 icrf/icrf 332 白、 非、卷 IcrF/icrf 59 有色、毛、正 iCrf/icrf 64 白、 毛、正 ICrf/icrf 85 有色、非、卷 icrF/icrf 82 ↓ ↓ I Cr F 12.5 17.0 29.5 （2）性染色体上的基因定位 以果蝇为例： Echinus（棘眼，眼睛面积特大） ec Scute （胸部缺少刚毛） sc Crosseinless（翅上横脉缺失） cv 三个伴性基因（突变基因）均为隐性，而它们的显性均为“+”。三个基因都是X染色体连锁遗传。 P: 棘眼(♀) × 缺胸刚毛/缺翅横脉(♂) 三点实验： ec + +/ec + + ↓ + sc cv/Y ec + +/+ sc cv(♀) : ec + +/Y (♂) F1: 测交实验： F1b1 ec + +/+ sc cv(♀) × ec sc cv/Y ↓ ↓ ↓ ec + +/ec sc cv（棘眼、正常、正常） 810 + sc cv/ec sc cv（正常、缺失、缺失） 828 ec + cv/ec sc cv（棘眼、正常、缺失） 103 + sc +/ec sc cv （正常、缺失、正常） 89 ec sc +/ec sc cv （棘眼、缺失、正常） 62 + + cv/ec sc cv （正常、正常、缺失） 88 ec sc cv 7.6 9.7 17.3 (3)双交换（double crossingover) 生殖细胞染色体在减数分裂前期，三个基因位点同时在两两之间发生姊妹染色单体的节段性交换。 ——双交换概率显著低于单交换的概率； ——3个连锁基因间发生双交换的结果是旁侧基因无重组。 特点: （如果两次交换互不干扰，各自独立， 双交换概率=单交换1×单交换2） 以家兔为例： 全色类型基因--- C （显）， 喜马拉雅型基因------ Ch （隐） 体色为黑色------ B （显）， 体色为褐色------------ b （隐） 体脂为白色------ Y （显）， 体脂为黄色----------- y （隐） 喜马拉雅型、黑色、白脂 × 全色型、褐色、黄脂 （ChBY /ChBY） （Cby/Cby） （ChBY/ Cby） 杂交实验： ↓ ↓ 全色、黑色、白脂 × 喜马拉雅型、褐色、黄脂 （Chby/Chby） ↓ Y Ch B 13.6 28.2 41.8 （Ch—Y）+ （Y—B）≠（Ch—B） ? Ch B Y y C b Ch B Y y C b y C b y C b Ch B Y Ch B Y Ch B Y y C b Ch b y Y C B Ch b Y C
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