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- 2023-06-18 发布于山东
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实验一 还原糖的测定
(3,5-二硝基水杨酸法)
;
掌握还原糖和总糖的测定原理,学习用3,5-二硝基水杨酸法测定还原糖的方法。
; 单糖和某些寡糖含有游离的醛基或酮基,有还原性,属于还原糖;而多糖和蔗糖等属于非还原性糖。利用多糖能被酸水解为单糖的性质可以通过测定水解后的单糖含量对总糖进行测定。
; 还原糖在碱性条件下加热被氧化成糖酸及其他产物,3,5-二硝基水杨酸则被还原为棕红色的3-氨基-5-硝基水杨酸。在过量的NaOH碱性溶液中此化合物在540nm处有最大吸收,在一定的浓度范围内还原糖的量与光吸收值呈线性关系,利用比色法可测定样品中的含糖量和总糖的含量。
;;三、实验器材
1.红薯。
2.试管1.5cm × 15cm(× 8)。
3.吸管 0.2ml(× 2)、0.5ml(× 2)、1ml(× 5)、10ml(× 1)。
4.水浴锅。
5.电陶炉。
6.722型(或7220型)分光光度计。
7.容量瓶100ml(× 3)。
8.量筒、研钵、三角烧瓶、玻璃漏斗。
9.电子分析天平。;四、实验试剂
1. 标准葡萄糖溶液(1.0mg/ml):准确称取干燥恒重的葡萄糖200mg,溶于蒸馏水并定容至100ml,混匀,4℃冰箱中保存备用。
2. 3,5-二硝基水杨酸(DNS)试剂:将2.5g DNS和150ml
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