NY_T 3872-2021CN 食用菌中L-麦角硫因的测定 超高效液相色谱法.docx

ICS 65.020.01 CCS B 04 NY 中 华 人 民 共 和 国 农 业 行 业 标 准 NY/T 3872-2021 食用菌中L- 麦角硫因的测定 超高效液相色谱法 Determination of L-ergothioneine in edible fungi—Ultra high performance liquid chromatography 2021-05-07 发布 2021-11-01 实施 中华人民共和国农业农村部 发布 I NY/T 3872—2021 前 言 本文件按照GB/T 1.1—2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由农业农村部种植业管理司提出并归口。 本文件起草单位：上海市农业科学院、农业农村部食用菌产品质量监督检验测试中心(上海) 本文件主要起草人：张艳梅、鄂恒超、赵晓燕、周昌艳、陈磊、赵志勇、李晓贝、刘海燕、任佳丽、冯路路、 白冰、董慧、范婷婷、何香伟、李健英。 NY/T 3872—2021 食用菌中 L-麦角硫因的测定 超高效液相色谱法 1 范围 本文件规定了食用菌中L-麦角硫因含量的超高效液相色谱测定方法。 本文件适用于食用菌中 L 麦角硫因含量的测定。 本文件方法的定量限：鲜样为2.0 mg/100g, 干样为4.0 mg/100g。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件， 仅该口期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本 文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 GB/T 12728 食用菌术语 3 术语和定义 GB/T 12728界定的以及下列术语和定义适用于本文件。 3.1 L-麦角硫因 (L-ergothioneine) 学名2-巯基-组氨酸-三甲基内盐，摩尔质量229.3 g/mol,易溶于水，不易分解，对热不敏感，是一种具 有重要生理活性的稀有天然手性氨基酸。 4 原理 食用菌样品中L-麦角硫因经甲醇(甲醇-水)溶液提取，通过色谱分离后，用配置有紫外检测器或二极 管阵列检测器的超高效液相色谱仪测定，以峰面积计算，外标法定量。 5 试剂与材料 除非另有说明，本方法所用试剂均为分析纯试剂，实验室用水符合GB/T 6682 中一级水的规定。 5.1 乙腈(CH?CN,CAS 号：75-05-8),色谱纯。 5.2 甲醇(CH?OH,CAS 号：67-56-1),色谱纯。 5.3 甲酸(HCOOH,CAS 号：64-18-6),色谱纯。 5.4 0.1%甲酸甲醇溶液：准确吸取1mL 甲酸(5.3)加甲醇(5.2)定容至1000 mL, 混匀。 5.5 70%甲醇水溶液：量取700 mL, 甲醇(5.2)加水至1000 mL, 混匀。 5.6 0.1%甲酸乙腈溶液：准确吸取1 mL 甲酸(5.3)加乙腈(5.1)定容至1000 mL, 混匀并脱气。 5.7 0.1%甲酸水溶液：准确吸取1 mL 甲酸(5.3)加水定容至1000 mL, 混匀并脱气。 5.8 L-麦角硫因(C?H?N?O?S,CAS 号：497-30-3)标准品：纯度≥98%, 5.9 L-麦角硫因标准储备溶液配制：称取L-麦角硫因标准品10 mg (精确至0.0001g),用水溶解并定容 至10 mL。L- 麦角硫因标准储备溶液(1000 mg/L),-18℃ 保存，有效期2个月 5.10 L-麦角硫因标准工作溶液配制：准确移取一定量的L-麦角硫因标准储备溶液(5.9),用0.1%甲酸 甲醇溶液(5.4)逐级稀释得到一系列的标准工作溶液(质量浓度分别为1.0 mg/L、2.0 mg/L、5.0 mg/L、 10.0 mg/L,20.0 mg/L、50.0 mg/L)。 临用现配。 5.11 有机系微孔滤膜：0.22μm。 2 NY/T 3872—2021 6 仪器和设备 6.1 超高效液相色谱仪：配置有紫外检测器或二极管阵列检测器。 6.2 天平：感量0.01g 和0.0001g。 6.3 超声波清洗器， 6.4 离心机：不低于4000 r/min。 6.5 氮气吹干仪。 6.6 涡旋混合器。 6.7 均质机。 6.8 样品粉碎机。 6.9 标准筛：0.425 mm。 7 分析步骤 7.1 试样制备 7.1.1 鲜样 取不少于1000g 食用菌鲜样，用干净纱布轻轻擦去表面附着物，切碎后，放置于均质机(6.7)中粉碎 成匀浆状，于密封容器中-18℃保存备用。称取试样时，冷