动物细胞融合和单克隆抗体3.pptxVIP

动物细胞融合和单克隆抗体3; 2002年12月30日， 两场筹备了10年的“太空婚礼”首次在神舟四号飞船上举行，植物细胞“新人”—黄花烟草和革新一号烟草叶肉细胞原生质体，动物细胞“新人”是小鼠B淋巴细胞和骨髓瘤细胞，两批新人同时在 “产房”—电融合仪内孕育新生命。;;知识回顾 植物体细胞杂交过程;一、动物细胞融合;第6页/共33页;不同DNA的两个细胞; 1、植物体细胞杂交时首先应用什么方法去掉细胞壁？动物细胞融合时需要进行去壁处理吗？为什么？ ;5、为什么灭活的病毒能作为诱导剂？灭活的原理是什么？ 因为灭活的病毒能使细胞膜上的蛋白质分子和脂质重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合。 ;（二）.原理：;有何同？不同？;主要用于制备;人们获得抗体的传统方法是什么?;如何获得化学性质单一、特异性强的抗体？;（一）.单克隆抗体的概念;（二）.单克隆抗体的制备过程;①为什么给小鼠注射特定的抗原蛋白？ ② 会有几种融合方式？ ③ 杂交瘤细胞是如何筛选出来的？有何特点？ ④ 是否所有的杂交瘤细胞都能产生专一性抗体？ ⑤ 如何大规模进行培养得到大量的单克隆抗体？;;诱导融合;已知细胞增殖时合成DNA有D和S两条途径，其中D途径能被氨基嘌呤阻断。 人淋巴细胞中有这两种DNA的合成途径，但一般不分裂增殖。 鼠骨髓瘤细胞中尽管没有S途径，但能不断分裂增殖， ; 骨髓瘤细胞是癌细胞吗？;动物特异性免疫 分离B淋巴细胞（B）；找到骨髓瘤细胞（G）。 细胞融合——三种融合方式:（BB;BG;GG） 第一次筛选：在“选择培养基培养”上培养筛选杂交瘤细胞（只有BG杂交瘤细胞存活）。 第二次筛选：对已经选择性培养的杂交瘤细胞进行“克隆化培养”，并进行“单一抗体检测”，“检测阳性”的即是所需要的杂交瘤细胞。 选择所需要的杂交瘤克隆细胞群，体外培养或注射到小鼠腹腔内增殖。 提取单克隆抗体。;2、为何要进行两次筛选？;特异性强，灵敏度高，可大量制备。; 1、作为诊断试剂： 具有准确、高效、简易、快速特点. 2、用于治疗疾病和运载药物： ;思考与探究; 2.制备单克隆抗体时，为什么要选用B淋巴细胞和??髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞？;1. 单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和B淋巴细胞诱导融合后，要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞，在这种培养基上不能存活增殖的细胞是 ①淋巴细胞　 ②小鼠骨髓瘤细胞　 ③B淋巴细胞自身融合细胞　 ④小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞　 ⑤杂交瘤细胞 A． ②④ B．①③⑤　　 C． ①②③④ 　 D．②③ ;2、1975年，英国剑桥大学分子生物学实验室的科勒和米尔斯坦，把小鼠的淋巴细胞（脾细胞）和小鼠的骨髓瘤细胞融合起来，成为杂交瘤细胞，实现在体外大量生产抗体的目的。实验过程如图所示。;3、下图表示单克隆抗体的制备过程，请分析完成下列问题：;（2）B过程是一个 过程，该过程的进行需要灭活的 或 诱导。 C→D是 过程，选出能产生特异性抗体 的 ，继续培养。 （3）单克隆抗体在疾病的诊断、治疗和预防方面与常规抗体相比，其特点是 。;谢谢 ;感谢观看！