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第1页/共32页生物22植物的克隆课件浙科版选修第2页/共32页植物组织培养植物克隆的技术基础是------------------，理论基础是----------------------------- 植物细胞的全能性第3页/共32页受精卵＞生殖细胞＞体细胞1、植物细胞的全能性1、定义： 是指植物体的每个生活细胞都具有发育成完整植株的潜能生物体的每一个细胞都包含有该物种的全套遗传物质，都有发育成为完整个体所必需的全部基因，从理论上讲，生物体的每一个活细胞都应该具有全能性。 2、原理： 3、大小： 不同植物或同一植物的不同基因型的个体，细胞的全能性表达程度不同 P23第4页/共32页自我评价C1、有关全能性的表述中，不正确的是 Ａ．受精卵在自然条件下能使后代细胞形成完 整个体，因此全能性最高 Ｂ．生物体内细胞由于分化全能性不能表达 Ｃ．卵细胞和受精卵一样，细胞未分化，全能 性很高 Ｄ．植物细胞离体培养在一定条件下能表现出 全能性第5页/共32页2、在一个生物体内，细胞没有表现出全能性，原因是（ ）Ａ．细胞失去了全能性　　　　　　　　Ｂ．细胞中的基因部分丢失Ｃ．细胞中的基因选择性表达　　　　　　Ｄ．细胞中的基因变异不同C第6页/共32页2.植物组织培养植物组织培养的概念 在无菌和人工控制的条件下,将离体的植物器官、组织、细胞，培养在人工控制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其产生愈伤组织、丛芽，最终形成完整的植株。理论基础：细胞的全能性第7页/共32页植物组织培养的培养基无机营养成分：矿质营养有机营养成分 ① 含N物质：包括维生素和氨基酸 ② 碳源：2%—5%的蔗糖 ③ 琼脂：起支持作用 ④ 激素：生长素，细胞分裂素PH值：5.0－6.0第8页/共32页一、植物组织培养的过程愈伤组织外植体植物体分化程度低脱分化较易幼芽或幼根？①适宜温度、pH和无菌环境。②无机物、有机物和植物激素（生长素，细胞分裂素）离体的植物器官、组织或细胞（分化）条件？脱分化特点？（未分化）无定形状态薄壁细胞高度液泡化排列疏松、无规则再分化取材少、繁殖率高培养周期短不受季节限制便于自动化管理培养无病毒植株（根尖、茎尖）保持亲本的优良性状（无性繁殖）（分化）优点？植物组织培养程序第9页/共32页1、配置半固体培养基2、无菌操作切取一些小块组织3、获得愈伤组织4、诱导愈伤组织5、再生新植株出现脱分化通过调节营养物质和生长调节剂的适当配比第10页/共32页切取接种愈伤组织的形成移栽培养室试管苗的形成第11页/共32页第12页/共32页植物组织培养的程序再分化脱分化胚性细胞外植体特点：细胞质丰富、液泡小而　细胞核大。第13页/共32页由恒温培养箱和振荡器组合而成，专为细胞培养提供控制和均衡的培养条件而设计，特别是悬浮液培养应用。 摇床：恒温摇床 超大容量恒温双层摇床 第14页/共32页想一想1、在植物组培过程中，为什么要进行一系列的消毒，灭菌，并且要求无菌操作？你认为杂菌和植物细胞之间有哪些关系？2、为什么切取胡萝卜根的形成层，其他部分也能培养成小植株吗？3、为什么诱导愈伤组织的过程中应避光培养？ 避免杂菌在上面迅速生长消耗营养，且有些杂菌会危害培养物的生长。竞争、寄生。 胡萝卜根形成层容易诱导成愈伤组织，其他部分如叶、花也能培养成小植株，只是稍微困难些。 在有光时，往往容易形成维管组织，而不易形成愈伤组织。第15页/共32页长期培养中细胞全能性下降的原因染色体畸变细胞核变异非整倍体的产生激素平衡被打破对外源生长物质的敏感性发生改变其他原因遗传物质的改变生长发育条件的改变要获得植物克隆的成功，需要怎么办？第16页/共32页克隆成功所需的条件1.探讨特定植物细胞全能性表达的条件(激素配比)2.选择性能优良、细胞全能型表达充分的基因型第17页/共32页植物组织培养的应用（1）试管苗的快速繁殖（2）无病毒植物的培育脱毒法：选取茎尖、根尖细胞（3）次生代谢物的生产人工种子提取紫草素 愈伤组织（4）人工种子 人工种子解决有些植物结子困难、发芽率低、繁殖困难等问题。（5）转基因植物的培育第18页/共32页用人工种皮包被体细胞胚，可以制造人工种子解决有些植物结子困难、发芽率低、繁殖困难等问题可以很方便的储藏和运输 现在已有胡萝卜、芹菜、柑橘、咖啡、棉花、玉米、水稻、橡胶等几十种植物的人工种子试种成功，但由于成本较高，中国尚未应用于生产。 人工种子第19页/共32页第20页/共32页器官培养和细胞培养器官培养指以植物的根、茎、叶、花、果等器官为外植体的离体无菌培养。细胞培养指以单个游离细胞为外植体的离体无菌培养。 第21页/共32页意义：1.在实验室可以进行植物受精，以及对胚胎发育过程的观察，从而研究其相关机理2.通过遗传工程操作，研究植物生长发育