第二章动物细胞工程.pptVIP

3. 融合细胞的筛选 人工诱导形成的融合细胞有两类，一类是同核体，另一类是异核体。把异核体从同核体以及未发生融合的亲本细胞中分离出来。分离方法包括非选择性筛选和选择性筛选。 当前第63页\共有125页\编于星期五\22点 （1）非选择性筛选 非选择性筛选是指用机械方法把单个融合细胞挑选出来，让其分裂增殖，培养出细胞克隆，也称单细胞克隆。 其缺点是融合细胞数量很少，挑选不易，而且挑选出来的细胞不一定分裂，因此有时需要挑选并分离大量的融合细胞，才能获得几株细胞克隆。 当前第64页\共有125页\编于星期五\22点 （2）选择性筛选 是根据细胞对药物的抗性、营养要求或温度敏感性等的不同，选择适当的培养条件，将杂交细胞分离出来。 ①抗药性筛选系统 常用的培养基有HAT培养基。 ②营养缺陷型筛选系统 当前第65页\共有125页\编于星期五\22点 二、单克隆抗体技术 通过融合两种细胞而同时保持两者的主要特征。这两种细胞分别是经抗原免疫的小鼠脾细胞和小鼠骨髓瘤细胞。脾淋巴细胞的主要特征是它的抗体分泌功能和能够在选择培养基中生长，小鼠骨髓瘤细胞则可在培养条件下无限分裂、增殖，即所谓“永生”性。 在HAT选择培养基的作用下，只有Ｂ细胞与骨髓瘤细胞