第六讲的生物合成与转录后加工详解.pptVIP

mRNA3′-端的多聚腺苷酸化可被冬虫夏草素 （ 3′-脱氧胸苷）所阻止； 即冬虫夏草素是多聚腺苷酸化的特异抑制剂。 mRNA的甲基化 真核生物mRNA分子中有许多甲基化的碱基， 主要是：N6-甲基腺嘌呤（m6A）。 当前第63页\共有93页\编于星期五\23点 3.2 rRNA前体的加工 原核细胞与真核细胞的rRNA前体都需加工： 大肠杆菌共有7个转录单位，每个转录单位 由16S rRNA、 23S rRNA、 5S rRNA及 一个或几个tRNA基因组成。 当前第64页\共有93页\编于星期五\23点 图5-10 p163 大肠杆菌 rRNA 前体加工过程 当前第65页\共有93页\编于星期五\23点 真核细胞 rRNA 基因为串联重复序列： 由18S rRNA、 28S rRNA、5.8S rRNA基因 组成一个转录单位，彼此被间隔区分开。 每个重复单位之间的间隔DNA序列不转录，称为非转录间隔序列。 真核生物 5S rRNA基因也是成簇排列的， 中间隔以不被转录的区域，它由RNApol Ⅲ转录，加工成熟后构成核糖体大亚基。 不同生物的 rRNA 前体大小不同： 哺乳动物为45S；果蝇38S；酵母37S；四膜虫35S 当前第66页\共有93页\编于星期五\23点 （2）转录的起始 转录起始需解决两个问题： RNA聚合酶必须准确地结合在转录模板的起始区域。 DNA双链解开，使其中的一条链作为转录的模板。 当前第31页\共有93页\编于星期五\23点 4. －10区DNA双链解开12～17bp，形成开放的二 元启动子复合物（模板－酶）。 2. RNA聚合酶全酶(?2????)与模板－35序列结合，形成闭合的二元闭合启动子复合物。 转录起始过程 1. ?因子辨认转录起始点（-35区的TTGACA序列） 3. RNA聚合酶向－10区转移，并与之牢固结合。 当前第32页\共有93页\编于星期五\23点 RNApol (?2????) - DNA - pppGpN- OH 3? 转录起始复合物: 5?-pppG -OH + NTP ? 5?-pppGpN - OH 3? + ppi 5. 在RNA聚合酶β亚基催化下形成第一个磷酸二酯键，形成三元复合物（模板－酶－RNA）。 6. 当三元复合物中RNA长6～9个核苷酸时，?因子 从全酶解离下来，进入延长阶段。 RNA聚合酶有两个核苷酸结合位点： 一个是起始核苷酸位点；一个是延长核苷酸位点。 一般只有嘌呤核苷酸填充了起始位点，才能形成 第一个磷酸二酯键。 当前第33页\共有93页\编于星期五\23点 RNA合成的第一个核苷酸总有GTP或ATP，以GTP常见，此时?因子从全酶解离下来，靠核心酶在DNA链上向下游滑动，而脱落的?因子与另一个核心酶结合成全酶反复利用。 当前第34页\共有93页\编于星期五\23点 真核生物转录起始十分复杂，往往需要多种蛋白因子的协助，已经知道，在所有的细胞中有一类叫做转录因子的蛋白质分子，它们与RNA聚合酶Ⅱ形成转录起始复合物，共同参与转录起始的过程。 当前第35页\共有93页\编于星期五\23点 真核生物基因中，有专门为蛋白质编码的基因，这些基因由RNA聚合酶Ⅱ负责进行转录起始关键性作用。根据这些转录因子的作用特点可大致分为以下二类： 当前第36页\共有93页\编于星期五\23点 第一类为普遍转录因子：它们与RNA聚合酶Ⅱ共同组成转录起始复合物，转录才能在正确的位置上开始。普遍转录因子是由多种蛋白质分子组成的，其中包括特异结合在TATA盒上的蛋白质，叫做TATA盒结合蛋白，还有形成一组复合物叫做转录因子ⅡD。TFⅡD再与RNA聚合酶Ⅱ结合完成转录起始复合物的形成（图6-5） 。 当前第37页\共有93页\编于星期五\23点 图6-5　转录起始复合物的模式图 当前第38页\共有93页\编于星期五\23点 第二类转录因子为组织细胞特异性转录因子或者叫可诱导性转录因子：这类TF是在特异的组织细胞或是受到一些类固醇激素，生长因子或其它刺激后，开始表达某些特异蛋白质分子时才需要的一类转录因子。 当前第39页\共有93页\编于星期五\23点 RNA链的延长靠核心酶的催化，在起始复合物上第一个GTP的核糖3’-OH上与DNA模板能配对的第二个三磷酸核苷酸起反应形成磷酸二酯键。聚合进去的核苷酸又有核糖3’-OH游离，这样就可按模板DNA的指引，一个接一个地延长下去。因此RNA链的合成方向也是5’-3’。由于DNA链与合成的RNA链具