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实验一十七同功酶遗传标记分析 第1页/共15页 实验一十七 同功酶遗传标记分析 第2页/共15页 一、实验目的 1.掌握聚丙烯酰胺凝胶电泳分离同工酶的技术，了解同工酶分析在遗传学研究中的意义 2.同工酶遗传标记的分析 第3页/共15页 二、实验原理 同工酶是一类由具有不同分子结构和大小但具有相同催化功能的酶。同工酶分子的多种形式是由基因决定的，也即同工酶是基因表达的直接产物。由同一基因座的不同等位基因编码的各种同工酶又称为等位酶，它们从分子水平上反映了等位基因的相对差异。因此，同工酶不仅是一种生理生化指标，而且也是一种可靠的遗传标记。 制备丙烯酰胺凝胶时其凝胶的孔径由凝胶浓度（100毫升凝胶溶液中含有单体和交联剂总克数）决定。当采用垂直平板不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳体系时，一般上层是大孔径的浓缩胶（pH 6.8），下层为小孔径的分离胶（pH 8.9），电泳缓冲液为Tris－甘氨酸缓冲液（pH 8.3）。在这种不连续系统里，存在着电荷效应，分子筛效应和浓缩效应。蛋白质（酶）按其电荷效应和分子筛效应而被分离在凝胶的不同位置上。用此凝胶板与酶反应底物进行催化反应，再用生物染料染色便形成肉眼可见各种酶带。 第4页/共15页 三、实验材料 水稻（Oryza　Sativa）：二亲本、 F1、F2四种植株群体的幼苗 第5页/共15页 四、实验器具和药品 1.用具：电泳仪，电泳槽，注