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猪瘟病毒抗体ELISA检测方法 原理 猪瘟病毒(CSFV)ELISA抗体检测试剂盒，酶标板包被猪瘟病 毒E2抗原(gp55蛋白)，如果待检样品中含有猪瘟抗体，与其包 被的抗原结合后，将阻断HRP酶标记的E2单克隆抗体与包被的 抗原结合后，将阻断的HRP酶标记的E2单克隆抗体与包被抗原 的结合，从而减少显色反应。 试剂 IX洗涤液：10X洗涤缓冲液用蒸储水稀释10倍配成IX洗涤 液、TMB底物液。 设备耗材 单道微量移液器和吸头、计时器、加样槽、蒸偏水、酶标仪 (450nm)o 操作步骤 .试剂盒内所有组份取出，在恒温箱(25+31)中放置至少 60分钟，恢复至室温，打开铝箔袋取出抗原包被板。 .在稀释板中加入70uL样品稀释液，各孔加入70uL血 清样品。同样比例稀释阳性对照血清(PC)与阴性对照血清 (NC),充分混匀。于抗原包被板孔中分别加入100UL稀释后的 样品以及100 uL稀释后阴性对照血清(NC)和阳性对照血清 (POo盖上封板膜，室温(25±3。0下孵育60分钟。 3?洗板，弃去孔中液体，每孔加300 uLl倍洗涤液，洗涤3 次。最后一次洗涤后将酶标版在吸水纸上轻轻拍干，严禁各步骤 之间孔板出现干燥情况。每孔加入100ULCSFVE2HRP标记抗 体。盖上封板膜，室温（25±3（）下孵育30分钟。 .重复步骤1、2、3o .每孔加入lOOuLTMB底物液。 .盖上封