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原核和真核生物中各种起始因子的生物功能 . . 当前第94页\共有153页\编于星期六\9点 延长阶段由一循环反应过程来完成,每次循环增加一个氨基酸残基。 在翻译起始复合体形成的基础上,活化氨基酸在核糖体上反复翻译mRNA上的密码并缩合生成多肽链的循环反应过程,称为核糖体循环。 核糖体循环包括多肽链合成的进位、转肽、脱落和移位三步反应。 三、肽链的延长 当前第95页\共有153页\编于星期六\9点 1. 进位 即与mRNA下一个密码相对应的氨基酰tRNA进入核糖体的A位。此步骤需GTP,Mg2+,和EF-T参与。 当前第96页\共有153页\编于星期六\9点 当前第97页\共有153页\编于星期六\9点 2. 转肽 是由肽基转移酶(peptidyl transferase)催化的肽键形成过程。 在肽基转移酶的催化下,将给位上的tRNA所携带的fMet基或肽酰基转移到受位上的氨基酰tRNA上,与其?-氨基缩合形成肽键。 当前第98页\共有153页\编于星期六\9点 转肽反应过程 当前第99页\共有153页\编于星期六\9点 3. 移位 延长因子EF-G有转位酶( translocase )活性,可结合并水解1分子GTP,促进核糖体向mRNA的3侧移动相当于一个密码的距离,同时使肽酰基tRNA从A位移到P位。此步骤需GTP和Mg2+参与。 当前第100页\共有153页\编于星期六\9点 移位反应过程 当前第101页\共有153页\编于星期六\9点 进位 移位 转肽 核糖体循环的反应过程 当前第102页\共有153页\编于星期六\9点 多肽链合成的延长因子 当前第103页\共有153页\编于星期六\9点 四 、肽链合成的终止和释放 核糖体沿mRNA链滑动,不断使多肽链延长,直到终止信号进入A位。 识别:RF(释放因子)识别终止密码,进入核糖体的A位 水解:RF使转肽酶变为酯酶,多肽链与tRNA之间的酯键被水解,多肽链释放 脱离:模板mRNA、RF以及空载tRNA与核糖体脱离 当前第104页\共有153页\编于星期六\9点 多肽链合成的终止过程 GTP 当前第105页\共有153页\编于星期六\9点 U A G 5 3 RF COO- 原核生物释放因子:RF-1,RF-2,RF-3 真核生物释放因子:eRF 当前第106页\共有153页\编于星期六\9点 RF的生物学功能主要有: 识别终止密码,如RF-1特异识别UAA、UAG;而RF-2可识别UAA、UGA。 诱导转肽酶改变为酯酶活性,酯键被水解,相当于催化肽酰基转移到水分子-OH上,使肽链从核蛋白体上释放。 当前第107页\共有153页\编于星期六\9点 多聚核糖体(polysome) ——使蛋白质合成高速、高效进行。 当前第108页\共有153页\编于星期六\9点 当前第62页\共有153页\编于星期六\9点 当前第63页\共有153页\编于星期六\9点 当前第64页\共有153页\编于星期六\9点 二、rRNA 5S rRNA 23S rRNA 16S rRNA 5.8S rRNA 5S rRNA 28S rRNA 18S rRNA 真核生物 原核生物 当前第65页\共有153页\编于星期六\9点 当前第66页\共有153页\编于星期六\9点 原核生物翻译过程中核糖体结构模式 A位:氨基酰位 (aminoacyl site) P位:肽酰位 (peptidyl site) E位:排出位 (exit site) 当前第67页\共有153页\编于星期六\9点 三、核糖体的功能 当前第68页\共有153页\编于星期六\9点 活性中心: mRNA结合部位 结合或接受AA-tRNA部位 结合或接受肽基tRNA的部位 肽基转移部位 形成肽键的部位(转肽酶的中心) 负责肽链合成的各种因子的结合位点 当前第69页\共有153页\编于星期六\9点 A P 肽基转移酶位点 肽酰结合位点(P位) 氨酰接受位点 (A位) mRNA结合位点 小亚基 大亚基 U A C 氨酰-tRNA 肽酰-tRNA A A C 功能位点 E 当前第70页\共有153页\编于星期六\9点 当前第71页\共有153页\编于星期六\9点 第四节 蛋白质合成的生物学机制 当前第72页\共有153页\编于星期六\9点 20种氨基酸(AA)作为原料 酶及众多蛋白因子,如IF、eIF ATP、GTP、无机离子 参与蛋白质生物合成的物质包括 三种RNA mRNA(messenger RNA, 信使RNA) rRNA(ribosomal RNA, 核糖体RNA) tRNA(transfer RNA, 转移RN
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