实验十一植物体内过氧化物酶活性的测定.pptxVIP

实验十一植物体内过氧化物酶活性的测定第1页/共9页第2页/共9页一、原理过氧化物酶 过氧化物酶[perox idase, POD] 广泛存在于各种动物、植物和微生物体内。催化由过氧化氢参与的各种还原剂的氧化反应: RH2+ H2O2→2H2O + R第3页/共9页2　POD 分子结构特点POD 是一种由单一肽链与卟啉构成的血红素蛋白, 脱辅基蛋白分子须与血红素结合才构成全酶。第4页/共9页3、POD的主要生理功能参与活性氧代谢过程；参与木质素和木栓质的合成；参与生长素的降解。 注：除了与植物正常代谢和生长发育相关的结构型POD 外, 很大部分POD的合成属于诱导表达型。第5页/共9页二、实验材料与试剂实验材料： 不同浓度Cd处理7d的菱叶片；试剂 0.1mol/L 磷酸缓冲液（pH6.0） 0.1mol/L 磷酸缓冲液（pH7.0） 愈创木酚； H2O2。第6页/共9页三、实验步骤提取酶液： 叶片2片（w gFW）+pH7.0磷酸缓冲液5mL 研磨，离心（4000rpm*10min），上清液即为粗酶液。第7页/共9页2、配制反应液1mol/L 磷酸缓冲液（pH6.0） 50ml +28uL愈创木酚+19uLH2O2(30%) 一般临用前配制，冰箱内短期保存。第8页/共9页2、酶反应3mL反应液+0.2mL粗酶液，震荡混匀后立刻记时，以3mL反应液+ 0.2mL磷酸缓冲液调零，