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肿瘤治疗性疫苗 ●上市产品:黑色素疫苗(Corixa公司,加拿大)。 ●临床Ⅲ期:IMC—BEC2(Imclone公司),用于肺癌。 ●临床Ⅰ期:HER/Neu基因蛋白疫苗( Corixa公司), 用于乳腺癌(2003年6月); 质粒DNA疫苗( Corixa公司),用于肺癌。 当前第30页\共有68页\编于星期四\11点 目前肿瘤治疗性疫苗还有诸多问题有待于解决,主要表现在以下几个方面: 第一,众多实体肿瘤缺乏特异性抗原,尽管目前已在实体肿瘤中发现了500多种肿瘤抗原,但只有少数抗原较为特异,且这些抗原免疫原性较弱。在近几年的研究中发现:仅激活CD8+ T细胞不足以产生有效的细胞免疫,同时需要CD4+ T细胞参与。而目前的疫苗缺乏这种设计。 当前第31页\共有68页\编于星期四\11点 第二、疫苗缺乏有效的抗原递呈。现有的疫苗在此环节上存在两个严重问题:一是进入的大部分疫苗与APC不能充分接触难以实现抗原递呈;二是即使有少量疫苗被APC捕获,也因抗原表达量甚微难以发挥有效的抗原递呈。 当前第32页\共有68页\编于星期四\11点 第三、如何打破机体免疫耐受。肿瘤细胞通过下调Fas的表达来逃避Fas介导的细胞凋亡。尽管目前通过采用共刺激分子修饰的疫苗有可能打破机体对肿瘤的免疫耐受,但目前尚缺乏有效的实验数据。 当前第33页\共有68页\编于星期四\11点 新的肿瘤靶基因 针对肿瘤相关抗原的靶向治疗(又称分子靶药物)是提高肿瘤治疗效果的重要途径。随着分子生物学的发展,肿瘤新靶基因被不断发现。 生存素(Survivin)是近年来新发现的凋亡蛋白抑制因子;阻断生存素的活化(如采用反义核酸技术),可导致肿瘤细胞的凋亡。 当前第34页\共有68页\编于星期四\11点 新的肿瘤靶基因 2002年美国科学家在胚胎干细胞、神经干细胞、多种人类肿瘤细胞中发现了一种大量存在于细胞核中的蛋白质(nucleostemin)及其基因,该基因位于人类3号染色体,表达550个氨基酸;目前众多的科学家一致认为该基因亦是某些肿瘤治疗的又一靶基因。 当前第35页\共有68页\编于星期四\11点 ※ 综上所述,疫苗、细胞因子、肿瘤血管生成抑制剂及单克隆抗体已成为肿瘤治疗的有效方法。它们均涉及到生物医药的重要领域——蛋白质表达与纯化技术,这正是生物医药产业化开发的关键所在。 ● 我国目前生物技术产业化最大难点。 当前第36页\共有68页\编于星期四\11点 蛋白表达载体 ?原核——大肠杆菌表达体系 ? 真核——a 酵母 b 哺乳动物细胞—CHO细胞 c 昆虫 当前第37页\共有68页\编于星期四\11点 大肠杆菌表达是目前最成熟的表达体系。具有操作简单、成本低产量高(表达量10%~70%)。 缺点:a、大多以包涵体形式出现(尽管设计成分泌型) b、产物缺乏糖基化 c、含有大量内毒素,给纯化带来极大不方便 当前第38页\共有68页\编于星期四\11点 ?酵母是外源基因表达最理想的真核表达体系 它具有许多优点:?遗传背景清楚 ?具有翻译后修饰加工系统,如糖基化 ?不产生毒素,不含特异性的病毒 ?大规模发酵简单,成本低 ?表达产物分泌到胞外,有利于纯化 ?表达量可达菌体蛋白10%~30% 当前第39页\共有68页\编于星期四\11点 蛋白质表达 蛋白一级结构的改构 (改变或不改变氨基酸) 增加生物活性或(和)减毒 改变与某些物质的亲和力 增加在体内的半衰期
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