细菌遗传学与基因工程.pptxVIP

细菌遗传学与基因工程;第一节 DNA的重组和重组DNA技术;Section 1  DNA recombination ;Section 1 Recombination DNA technical;一、 重组DNA技术发展史上的重大事件;年份 事 件 ;年份 事 件 ;年份 事 件 ;年份 事 件 ;二、重组DNA技术的主要内容或步骤;第11页/共58页;三、重组DNA技术的主要技术原理 ;重组DNA技术的主要技术原理 ;重组DNA技术的主要技术原理 ;第15页/共58页;重组DNA技术的主要技术原理 ;;重组DNA技术的主要技术原理 ;5．限制性酶切-“分子手术刀” restrictionendonuclease:在特殊核甘酸序列处水解双链DNA的内切酶。Ⅰ型：既能催化宿主DNA的甲基化，又催化非甲基化的DNA的水解；Ⅱ型：只催化非甲基化的DNA的水解。 ;5. 限制性核酸内切酶——“分子手术刀” ;;6．DNA连接酶——“分子缝合针” 作用：恢复被限制酶切开了的两个脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键。 种类 ⑴ E.coli DNA连接酶：只能缝合双链DNA片段互补的黏性末端，而不能将双链DNA平末端进行连接。 ⑵ T4 DNA连接酶：既可缝合DNA片段互补的黏性末端，又可缝合双链DNA片段的平末端。但连接平末端之间的效率比较低。;6．DNA连接酶——“分子缝合针” DNA连接酶和