口蹄疫液相阻断.pptVIP

演示文稿口蹄疫液相阻断 当前第1页\共有18页\编于星期五\5点 （优选）口蹄疫液相阻断 当前第2页\共有18页\编于星期五\5点 一、液相阻断ELISA基础知识 液相阻断ELISA（LB-ELISA）通途： 1、检测口蹄疫感染，广泛用于国际贸易中，是OIE指定方法之一； 2、监测牛、羊和猪等偶蹄动物血清中口蹄疫免疫效价，评价口蹄疫疫苗免疫效果。 当前第3页\共有18页\编于星期五\5点 BL-ELISA原理图 待检血清与病毒抗原混合液 捕获抗体 检测抗体 病毒酶结合物 显色液 阳性不显色 阴性显黄色 当前第4页\共有18页\编于星期五\5点 BL-ELISA反应原理： 将预先滴定好的病毒抗原与被检血清首先在液相中反应，然后将抗原抗体复合物转移到包被了口蹄疫特异性抗体的ELISA板中，没有完全被血清抗体阻断的病毒抗原被ELISA板中的抗体捕获，再通过酶结合物与底物显色。按照实验孔呈现颜色与抗原对照（未加血清）孔呈现颜色相比较判定结果。 抗体滴度以阻断50%病毒抗原的血清稀释度表示。 当前第5页\共有18页\编于星期五\5点 二、实验前准备 1、使用前，试剂盒所有组份应回复到18-26℃，试剂要混合均匀，每个样品使用一个吸头。 2、浓缩洗涤液用蒸馏水或去离子水25倍稀释。 当前第6页\共有18页\编于星期五\5点 三、实验操作步骤 1、抗原抗体反应布板 当前第7页\共有18页\编于星