抗体的制备及应用工作.pptVIP

抗体的制备及应用工作;*;一;抗原设计; 原理：蛋白质表面部分可以使免疫系统产生抗体的区域叫抗原决定簇。一般抗原决定簇是由6－12个氨基酸或碳水基团组成。为选择好的抗原决定簇，应符合以下三点：1．亲水性：大部分抗原决定簇是亲水性的；2．处于结构表面：大部分抗体只与蛋白质表面部分结合；3．有弹性：许多已知的抗原决定簇是在自由活动区域。所以很多蛋白质的决定簇处于N端或C端。;抗原设计;软件预测表位 分析氨基酸序列中是否存在信号肽 利用生物软件进行抗原表位预测 ? DNAstar（Protean）、DNASSIST ;信号肽预测;抗体的制备及应用工作;抗原表位预测;抗原表位预测;重组蛋白抗原设计;跨膜区预测;抗体的制备及应用工作;利用BLAST工具进行同源性搜索;生工为您免费完成多肽抗原设计;一;抗原制备;多肽合成后须偶联到载体蛋白（KLH，BSA，OVA），才可 以获得高效的抗体。多肽与载体蛋白偶联的方式如下： N端氨基偶联到载体蛋白 C端羧基偶联到载体蛋白 Cys巯基偶联到载体蛋白; 载体蛋白交联的基本原则 将载体蛋白加在远离抗体识别区域的一端 在序列中没有Cys的情况下在N或C端加上Cys为交联的首选方法。;获取目的基因 基因亚克隆至表达载体 转化细菌并诱导表达 纯化蛋白 SDS、Western blo