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基因操作主要技术原理;目的基因的表达;1.基因扩增gene amplification;2.核酸凝胶电泳gel electrophoresis;3.DNA核苷酸序列分析;4.核酸分子杂交;实验步骤: 核酸印迹转移 电泳凝胶核酸印迹法 斑点和狭线印迹法(dot and slot blotting) 菌落和噬菌斑印迹法(colony and plaque blotting) 印记杂交;5.细菌转化(transformation);;人工诱导感受态的方法: ① 利用Ca2+和改变温度的方法，这在大肠杆菌中常用到。 ② PEG介导的转化：利用聚乙二醇（PEG）改变原生质体 表面的电荷特性，使得细胞容易吸收 DNA/质粒，在等渗溶液中使转化子再生。 ③ 电转化（电穿孔法): 其原理是用高压脉冲电流击破细胞膜或形成小孔，使得DNA大分子进入细胞。当电场强度、脉冲强度以一定的组合造成细胞50-75%的死亡率时，转化水平最高，转化率是人工制备感受态细胞转化率的10-20倍。 ④ Biolistic(基因枪)转化 : 将包裹有DNA的钨粒象子弹一样高压射入细胞或细胞器。;影响因素;PCR技术的研究应用;;影响迁移率的若干因素: DNA本身的因素: DNA 大小、构象; 凝胶的因素: 凝胶的浓度; 电场的因素: 电压大小