外源基因在大肠杆菌中的表达.pptxVIP

外源基因在大肠杆菌中的表达;重组DNA技术与基因工程;A 大肠杆菌作为表达外源基因受体菌的特征;A 大肠杆菌作为表达外源基因受体菌的特征;B 外源基因在大肠杆菌中高效表达的原理;启动子 启动子最佳距离的探测;启动子 启动子的筛选;启动子 启动子的构建;启动子 启动子的可控性;启动子 启动子的可控性;Ptrp;l 噬菌体启动子PlL的可控性：;终止子 强化转录终止的必要性;终止子 强终止子的选择与使用;核糖体结合位点;大肠杆菌核糖体结合位点包括下列四个特征结构要素： 位于翻译起始密码子上游10个碱基内的序列 5’-UAAGGAGG 3’，即Shine-Dalgarno（SD）序列，它通过识别大肠杆菌核糖体小亚基中的16S rRNA 3’端区域3’ AUUCCUCC 5’并与之专一性结合，将mRNA定位于核糖体上，从而启动翻译； 翻译起始密码子，大肠杆菌绝大部分基因以AUG作为阅读框架的起始位点，但有些基因也使用GUG或UUG作为翻译起始密码子； SD序列与翻译起始密码子之间的距离及碱基组成； 基因编码区5’端若干密码子的碱基序列；;核糖体结合位点;核糖体结合位点;核糖体结合位点;核糖体结合位点;密码子 生物体对密码子的偏爱性;密码子 生物体对密码子的偏爱性;密码子 密码子偏爱性对外源基因表达的影响; 按照大肠杆菌密码子的偏爱性规律，设计更换外源基因中不适宜的相应简并密码子，重组人胰岛素、干扰素以及生长激素在大肠杆菌;密码子 密码子偏爱性对外源基因表达的影响;质粒拷贝数;质粒拷贝数;C 大肠杆菌基因工程菌的构建策略;包涵体型异源蛋白的表达 包涵体及其性质;包涵体型异源蛋白的表达;包涵体型异源蛋白的表达;包涵体型异源蛋白的表达;包涵体型异源蛋白的表达 包涵体的变性与复性操作;包涵体的溶解与变性：;包涵体型异源蛋白的表达;包涵体的复性与重折叠（refolding）：复性操作;包涵体的复性与重折叠（refolding）：二硫键形成;分泌型异源蛋白的表达;分泌型异源蛋白的表达 以分泌形式表达目的蛋白的优缺点;分泌型异源蛋白的表达;分泌型异源蛋白的表达;分泌型异源蛋白的表达 分泌型目的蛋白表达系统的构建;融合型异源蛋白的表达;融合型异源蛋白的表达;融合型异源蛋白的表达 融合型目的蛋白表达系统的构建;用于融合蛋白构建的受体蛋白：;融合型异源蛋白的表达;融合型异源蛋白的表达 目的蛋白的回收;酶促裂解法：单残基位点;酶促裂解法：多残基位点;酶促裂解法：多残基位点;;;寡聚型异源蛋白的表达;寡聚型异源蛋白的表达 以寡聚形式表达目的蛋白的优缺点;寡聚型异源蛋白的表达 寡聚型目的蛋白表达系统的构建;构建举例：;整合型异源蛋白的表达;整合型异源蛋白的表达;整合型异源蛋白的表达;;整合型异源蛋白的表达 DNA体内重组的基本原理;整合型异源蛋白的表达 DNA体内重组的基本原理;整合型异源蛋白的表达;整合型异源蛋白的表达;;蛋白酶抗性或缺陷型表达系统的构建;蛋白酶抗性或缺陷型表达系统的构建;蛋白酶抗性或缺陷型表达系统的构建;蛋白酶抗性或缺陷型表达系统的构建; 大量的实验结果同时表明，如果多肽链的N末端序列中含有较高比例的Ala、Asn、Cys、Gln、His，则蛋白质的稳定性显著;D 利用重组大肠杆菌生产人胰岛素;胰岛素的结构及其生物合成;人胰岛素的生产方法;人胰岛素的生产方法;人胰岛素的生产方法;人胰岛素的生产方法;重组人胰岛素的大肠杆菌工程菌的构建;重组人胰岛素的大肠杆菌工程菌的构建;重组人胰岛素的大肠杆菌工程菌的构建;重组人胰岛素的大肠杆菌工程菌的构建;重组人胰岛素的大肠杆菌工程菌的构建;重组人胰岛素的大肠杆菌工程菌的构建;E 产生物柴油的大肠杆菌工程菌构建;E 产生物柴油的大肠杆菌工程菌构建;E 产生物柴油的大肠杆菌工程菌构建;E 产生物柴油的大肠杆菌工程菌构建;E 产生物柴油的大肠杆菌工程菌构建;E 产生物柴油的大肠杆菌工程菌构建;E 产生物柴油的大肠杆菌工程菌构建;E 产生物柴油的大肠杆菌工程菌构建;E 产生物柴油的大肠杆菌工程菌构建;感谢您的欣赏