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蛋白质检验方法——GB 5009.5-2016 一、样品外理 1、定氮蒸馏法：取0.2-2g样品，放入消化管中（定氮瓶）加入0.4g硫酸铜、6g硫酸钾，加入20mL硫酸，加热至消化液呈澄清透明后，再加热0.5-1h 2、定氮仪法：取0.2-2g样品，放入消化管中（定氮瓶）加入0.4g硫酸铜、6g硫酸钾，加入20mL硫酸，加热消化1h 二、检测 1、定氮蒸馏法：在定氮蒸馏装置中向水蒸气发生器加入三分之二水，加入数粒琉璃珠和甲基红乙醇溶液（1g/L）和数毫升硫酸，保持水呈酸性，加热至水溶液沸腾，向接收瓶内加入10mL硼酸(20g/L)及一二滴甲基红溴甲酚绿，将冷凝管插入液面下，根据氮含量将消化液（处理液）2-10mL加入反应室,再向反应室加入10mL水和10mL氢氧化钠（400g/L）然后盖紧玻塞，再水封。开始蒸馏，10分种后移动接收瓶，将冷凝管移出液面再蒸馏1分种，用水冲洗冷凝管下瑞，取下接收瓶，尽快用硫酸标准滴定溶液(0.05mol/L)滴定，滴定至灰蓝色。 2、定氮仪法：在500mL烧瓶（接收瓶）中加入20mL硼酸(20g/L)及二三滴甲基红溴甲酚绿和10mL水，然后放入定氮仪中，定氮蒸馏至200mL后取出滴定。 三、计算 1、定氮蒸馏法公式：[（V1-V2）×C×0.0140/(M×V3/100)] ×F(6.38) ×100 2、定氮仪法：[（V1-V2）×C×0.0140/ M ] ×F(6.38) ×100 V1：试液滴定消耗体积、V2：空白滴定消耗体积、C:浓度、M:试样质量、V3：吸取消化液体积、F:蛋白质换算系数、6.38：纯乳与纯乳制品